新規抗菌アジュバントの探索に関して、研究開発代表者・鈴木は、研究開発分担者・星野、五十風と連携して、大腸菌、黄色ブドウ球菌、Mycobacterium abscessusの標準株などを被験菌として、MMV Pandemic Response Box、既承認薬、臨床試験ドロップアウト薬、天然物ライブラリーなどを用いてアミノ配糖体およびマクロライド系抗菌薬の抗菌アジュバントの探索を行った。R6年度は研究班で連携して、ESKAPE細菌、抗酸菌、ボルデテラ属菌、ヘリコバクター属菌などを用いてヒット化合物の有効性の検証を行い、細菌における標的探索を試みる。また、AMED多分野融合研究領域・石澤班と連携して、ESBL産生大腸菌株を被験菌として、セフメタゾールまたはフロモキセフと相乗効果を有する既存抗菌薬の探索を行った。また、研究開発分担者・星野と連携して、ハイコンテントイメージングによる宿主細胞内の抗酸菌の定量手法を確立した。今後、抗菌アジュバントの2次スクリーニングにも応用したい。また、AMED多分野融合研究領域・深野班と連携して、ハイコンテントイメージングによる抗菌化合物暴露後の細菌生死のリアルタイム観察手法を確立した。今後、新規抗菌アジュバント候補の作用機序解析に応用したい。既にコリスチンの抗菌アジュバントとして見出している外膜タンパク質阻害化合物に関して、研究開発分担者・今崎、渡辺と連携して、X線構造解析により外膜タンパク質と既承認薬Xの結合様式を明らかにした。MST法により外膜タンパク質と既承認薬Xおよびその誘導体の相互作用を測定し、結合に重要なアミノ酸残基を同定した。また、研究開発分担者・竹内、渡辺と連携して、NMR解析により外膜タンパク質と既承認薬Xおよびその誘導体による阻害様式を明らかにした。また、研究開発分担者・渡辺、今崎と連携して、AI支援による既承認薬Xの大規模な骨格改変化合物の創製を進めた。