本研究開発では、人工赤血球(HbV)の治験薬GMP製造と医師主導Phase 1b治験を、奈良県立医科大学附属病院にて、3年計画(令和6-8年度)としてアカデミア主体で実施することを主たる目的としている。令和3年度実施の健常成人男性を対象としたPhase 1試験(FIH)(北大)に引き続いて、Phase 1b試験(奈良医大)では、健常成人男性と女性を被験者とし、4つのコホートに分け(各4例)、100～400 mLまでの投与量および投与速度の増大に対する認容性と、薬物動態を評価する。令和6年度は、治験開始に向け、院内にPhase 1ユニットを含む治験実施体制を構築した。CROと連携し、治験実施に必要な体制構築や、それに伴う手順書や計画書等の資料作成を行った。QMS構築、安全性情報の取扱い・対応方法のシステム構築、安全性評価委員会の組織作り、医師主導治験保険の加入、IRB申請、治験届、jRCT公開などを完了した。原薬となる精製ヘモグロビンと混合脂質の製造を外部委託するとともに、院内CPCにおける治験薬製造について、コールドランを経て治験薬の製造に着手した。追加支援を受け、原料Hbと混合脂質の追加製造とスケールアップを試行した。次相に向け並行して、大量投与を前提とする本製剤について、有効性の検証、さらに免疫系、血液凝固系、薬物代謝系の観点から先見的研究を進め、安全性に関する知見を得た。外科手術時の大量出血イヌに肺移植手術を行い出血性ショック状態としたモデルにおいて、平均血圧は加刀前の39％まで低下したが、HbVの投与により心拍出量と血圧が回復し、出血を代償したと考えられた。HbVをラットに大量投与した後に、肝臓・腎臓・小腸のトランスポーターを中心とした薬物動態関連因子の遺伝子誘導や発現阻害等を検討し、著変が無いことを確認した。ヒト全血をHbVと混合した20-50%の血液希釈の状況では、全血凝固時間は短縮し、総合的止血機能は低下した。トラネキサム酸(TXA)の添加は、血流下の一次止血機能低下を改善しなかったが、希釈性線溶亢進を改善した。HbVは緩衝液に比ベ、血液希釈による止血能障害に対して非劣性、TXA添加の効果に対しても非劣性であった。このことからHbVは、止血機能に負の影響を与えることなく赤血球の酸素運搬機能を代替し、併用した場合の抗線溶薬の効果も阻害しないことが示唆された。