【研究開発項目1：マーモセット胚の長期培養による試験管内脳神経発生モデルの確立】
これまでの研究では、培養した胚は受精後約20日間しか培養を続けられず、胚発生はカーネギーステージ（CS）6までしか確認されていなかった。本年度の研究では、マーモセット胚の長期培養において培養方法を改良した結果、受精後27日までの培養が可能となった。本研究の目的である培養期間の延長に成功し、疑似着床胚培養方法の改良が進められた。得られた疑似着床培養胚の免疫染色では、脊椎動物の発生段階であるCS7に類似した構造が形成されていることも確認された。現在、RNAシーケンシングによる詳細な解析を進めている。今後は、培養をさらに進めた上でsc RNA seq解析を行い、これまでのin vivoデータと比較することで、より詳細な解析を進める予定である。
【研究開発項目2：胚の長期培養を可能とする子宮内膜モデル培養方法の確立】
マーモセット子宮内膜組織を用いて、２次元空間トランスクリプトーム解析(HybISS)の実験方法の検討を行い、子宮組織を構成する細胞特異的なマーカー遺伝子発現の空間的情報の取得が可能となった。
また、子宮組織から上皮細胞と間質細胞を安定して樹立に成功し、初代培養法を確立した。sc RNA seq解析の結果から、これらの細胞をin vivoの子宮内膜に近い比率でin vivo様の構造を有する子宮内膜オルガノイドの作製した。今後は、作製した子宮内膜オルガノイドに対して、脱落膜誘導を行い、受精卵(胚)と共培養することで３次元胚着床モデルを作製する予定である。
【研究開発項目３：多能性幹細胞の開発と幹細胞胚モデルを利用した試験管内脳発生モデルの開発】　
ナイーブ型マーモセットES細胞を用いて、人工胚(ブラストイド)の誘導を行ったところ、栄養膜細胞マーカー(TFAP2C)陽性の胚盤胞腔様の構造を有したオルガノイドの形成に成功した。今後は、既報のマーモセット胚のデータセットと遺伝子発現を比較する予定である。