本研究は、神経変性疾患における異常タンパク質の蓄積に対し、グリア細胞による貪食機能を活性化することで除去を促進し、治療戦略へと結びつけることを目的としている。今年度は、スフェロイド型ニューロン・グリア共培養系（Glioneuronal unit, GNU）の最適化と、異常タンパク質貪食の観察系構築を中心に取り組んだ。
まず、GNU内に共存する神経細胞、アストロサイト、ミクログリアをそれぞれ蛍光標識するための手法を検討し、三種類の細胞の相互作用をリアルタイムで可視化可能な条件を確立した。これにより、高解像度ライブイメージングによって細胞間相互作用の時空間的解析を行うための基盤を整備した。
異常タンパク質のモデルとしては、初年度の実験系確立段階において再現性および定量性の高いアミロイドβを選定した。アミロイドβは神経変性疾患の中でも広く研究されており、蛍光標識製品が市販されていることから、培養系への安定的な導入と視覚化が可能である。本研究では、GNU培養系に蛍光ラベル済みアミロイドβを添加し、その存在と分布をライブイメージングにより確認した。
さらに、添加後のアミロイドβがミクログリア内へ取り込まれている様子を観察し、GNU内における異常タンパク質貪食の実証に成功した。これらの知見により、GNUを用いた異常タンパク質処理の評価系が構築され、今後の介入実験（貪食促進操作）やシグナリング動態解析へと発展させる基盤が整った。
以上の成果により、GNU系を活用した異常タンパク質除去メカニズムの解析に向けた第一段階が計画通りに進展した。