チーム１ 細胞開発／ちとせ研究所 本研究では、HAT細胞を用いたウイルスベクター製造プラットフォーム構築に向け、GMP準拠施設において作製されたHAT細胞由来のMCBを臨床用ホスト細胞として整備し、再生医療等製品材料として社会実装させることを目的とする。GMP準拠施設で作製されたMCBであっても、それ単体では臨床用ウイルスベクター製造用ホスト細胞の整備としては不十分である。そのため、作製されたHAT細胞由来のMCBについて、規制面からの要求事項を満たし、かつ、品質面においても安定した細胞基材であることを証明する必要がある。そこで、本研究では、HAT細胞に対する品質試験結果および細胞株樹立履歴の作成を通し、臨床用ホスト細胞に対する規制面からの要件を満たすことを検証する。また、MCBを用いた細胞基材安定性評価試験を実施し、臨床用ホスト細胞としての安定性を評価する。 チーム２　プロセス開発／大阪大学 本課題では、主に血液関連の遺伝性疾患等の治療パイプラインをモデルケースとして下記に取り組む。 1. HAT細胞による高品質少量多品種VV製造プラットフォームの構築 2. HAT細胞による高品質VVのモジュラー型GMP製造プラットフォーム開発と国産モジュールへの置き換え 3. HAT細胞によるVVのGMP製造と医師主導治験への提供 令和6年度からは臨床利用の可能性がある複数の血清型のAAVベクターについてGOIをGFPとして、HAT研究用（HAT-RU）細胞を用いてPF-Gen2をHAT用に改良したPF-Gen2/HATにより、1L以下程度での少量製造を行う。網羅的な品質分析を実施の上、既存商用HEK293細胞により製造したAAVベクターとの性能比較および特徴把握を行う。LVに関しては、HAT-RU細胞を用いて製造予定のLVベクターについて開発ステージに応じた分析を実現するため、特性解析に必要な不純物分析法と既存の分析法に加え、高度分析分析の開発も行う。まずは、購入品のLVベクターを用いた高度分析法の開発を進める。PF-Gen2/HATをベースに、HAT-RU細胞を用いてモジュラー型プラットフォーム少量製造プロセス、PF-Gen3の構築を開始する。 チーム３　臨床製造分析／ユー・メディコ社 昨今、世界中で遺伝子治療用組換えウイルスベクター（rVV）を利用した治療薬の開発が進んでいる。しかし、VVの製造には高度な技術が求められ、国内では安定供給が困難な状況にあり、このままでは有望な国内シーズが海外に流出し、遺伝子治療関連産業の空洞化が懸念される。したがって、高品質なベクターを低コストで安定生産できる技術と供給体制の構築が急務である。 本課題では、血液関連の遺伝性疾患治療をモデルに、GT第一期で樹立された国産のベクター製造用細胞（HAT細胞）を用いたアデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターのGMP製造におけるプロセス開発/分析法開発のプラットフォームの確立に取り組む。本研究の終了時には、国産のベクター産生細胞及び精製モジュールを組み込んだプロセスによりプラットフォーム製造された、高品GMPウイルスベクターの供給体制が整備され、国内での治験に貢献している計画である。国内での高品質な遺伝子治療用ベクターの安定的な供給の実現は、我が国の患者救済と産業発展の両面において大きなインパクトをもたらす チーム４　要素技術開発／次世代バイオ医薬品製造技術研究組合 次世代バイオ医薬品製造技術研究組合（MAB）を中心に遺伝子治療用ベクター製造大量製造プロジェクトに取り組み、新規ホスト細胞（HAT細胞）開発、製造工程での各種要素技術（国産の培養リアクターを用いた培養技術、清澄化工程における前処理剤と新規高性能フィルター、ポリッシング工程におけるイオン交換クロマト担体と精製プロセス開発、ゾーナル超遠心による完全粒子と空粒子の分離・精製）の開発、高度品質分析技術の開発、少量サンプルでの分析手法の開発等を行った。開発された製造及び分析に関する要素技術を草津集中研/MABに集約、統合することで、ベンチスケール（50L）での製造プラットフォームを構築し、高純度のAAVベクターを高収率に製造できることを実証した。 以上の成果を基盤に、本研究開発（チーム４）ではウイルスベクター製造に必要な拡大培養、生産培養、トランスフェクション、清澄化、精製、濃縮などの一連の工程における要素技術を開発、改良し、草津集中研で実証することで、これらの技術の早期の社会実装、製品化を目指す。さらに、開発した要素技術を組み込む形で、HAT細胞を用いたベンチスケールでのウイルスベクター製造検討を行い、得られた産物を要素技術開発のための共通材料として研究機関に提供する。 チーム５　規制科学／国立医薬品食品衛生研究所 昨今、新規モダリティとしての遺伝子治療の普及にともない、多くの遺伝子疾患に対する治療薬が上市されている。しかしながら、これらの治療薬の製造は発展途上の段階であり、高額な製造コスト、堅牢性、高度な製造技術が必要などの点で課題が多い。第一期で開発した国産細胞の臨床応用に向けての整備などに取り組むとともに、複数の遺伝子治療疾患シーズに対する治療用ベクターの製造プロセス開発、GMP ベクター製造および本ベクターを用いた治験に進むことを目標に複数のアプローチに取り組む。国立衛研は品質評価項目等を明確化及び、AAVベクター等に関する品質評価法について信頼性の検証等を行う。令和7年度は関連する調査研究、安定的な含量評価に向けた検討、必要に応じて開発品及び製造工程間試料に対する評価を行う。