本課題では、肝線維化に中心的な役割を果たす活性型肝星細胞における分子X に対するASO（アンチセンスオリゴヌクレオチド）を用いた線維性疾患治療薬の開発を推進した。MASH（代謝関連脂肪性肝炎）モデルにおいて、ASO#Xおよび改良型ASOの線維化改善効果を対照薬と比較評価した。その結果、ASO#X投与群では肝臓の結節状変化が抑制され、線維化面積の減少傾向を確認した。また線維化改善作用は対照薬を上回り、標的発現抑制との相関性も確認された。
さらに新規化合物ASO#Xの安全性評価試験として、MASHモデルマウスにおけるASO#X投与による肝毒性、腎毒性、血液凝固系への影響を詳細に検討した。その結果、いずれの項目においても有意な変化は認められなかった。さらにin vitro試験として、TLR-9を介した自然免疫賦活作用の測定系を確立し活性を評価したが、ASO#Xによる有意な活性化は確認されなかった。また、正常マウスにASO#Xを高濃度投与し補体C3の活性化を評価したが、同様に有意な変化は認められなかった。これらの結果は、ASO#Xが少なくとも本試験条件下においては、顕著な毒性を示さないことを示している。
また令和6年度はASO#Xの構造最適化において、チオリン酸（PS）結合の一部をリン酸ジエステル（PO）結合に置換したASOの活性を検討した結果、活性をほぼ同等に維持可能なPO置換部位を2箇所同定した。