プロトンポンプ阻害剤(PPI)は胃酸を中和させる作用があるため胃炎などの症状を緩和させるために使用されるが、PPIの多用は胃の細菌叢構成を乱し、胃の不調などに繋がる可能性が示唆されている。このため上部消化管を対象とした六君子湯がPPIに代わる治療として着目されているが、その免疫学的役割が一切不明である。そこで本研究では、マウスに六君子湯を経口で投与し胃の免疫応答を解析することで、六君子湯の作用メカニズムを科学的に明らかにすることを目的とし研究を実施した。<代表研究者>　C57BL/6マウスに1％六君子湯を混合した飼料を1週間投与し、胃の免疫応答を解析した。この結果、獲得免疫を担当するT細胞などに差は見られなかったのに対し、自然リンパ球（innate lymphoid cells: ILC）の増加を見出した。興味深い事に、このILCの増加は小腸（SI LPL）では確認されず、胃特異的な免疫応答であることが示された。一方、共生細菌が存在するSpecific pathogen free(SPF)マウスと無菌マウスに六君子湯を投与し比較・検討したところ、無菌マウスとの差は得られなかった。つまり、六君子湯投与により増加するILCは細菌叢非依存的であることが示唆された。
<分担研究者>　研究代表者が解析する六君子湯投与マウスの胃内容物および糞便の代謝物解析を担当した。腸内環境および免疫への影響を観察するため腸内細菌叢成分であるD-アミノ酸に関して液体クロマトグラフィー–タンデム質量分析法を用いた分析系を構築した。分析系構築に際し、各種検討（検量線、分析単位内・単位間再現性及びマウス便中アミノ酸の安定性）を行い、いずれもPMDAの医薬品開発における生体試料中薬物濃度分析法のバリデーションに関するガイドライン記載の基準を満たすことを確認した。