次世代シーケンサーの発展や低コストで網羅的なDNAマイクロアレイの発展により、多くのバリアントの同定が可能となった。その一方で、臨床的意義が不明なバリアント（VUS）が多数検出されるようになり、問題となっている。本研究では原発性免疫不全症候群の１種であるGATA2欠損症のVUSの意義同定を目的とする。GATA2欠損症の確定診断には病的意義のあるバリアントの同定が必要であり、本研究ではGATA2 VUSの機能的意義を明らかにすることでGATA2欠損症の診断に寄与する。令和6年度は1細胞レベルでの変異データとtranscriptomeデータの同時取得を一挙に行う技術の開発に成功し、特許出願を行なった。次に、VUSが集中するGATA2のZinc finger domainを中心に149変異パターンを導入するguide RNAを設計(コントロールも含めて636種類のguide RNA)し、慢性骨髄性白血病細胞株（KU812）でGATA2バリアントのハイスループットなスクリーニングを実施した。その結果、機能喪失に関わる可能性があるGATA2バリアントの候補を56種類同定した。さらに、検証実験としてiPS細胞から血球前駆細胞や単球へ分化させる系でもスクリーニングを実施し、データの解析を実施している。