レット症候群(RTT)は、X染色体上のMECP2遺伝子の変異による神経発達障害であり、主に女性に発症する。現在、有効な治療法は存在せず、遺伝子治療の開発が求められている。特に、RTTの重症度にはSkewed XCI(偏ったX染色体不活化)が関与し、変異アレルを発現する細胞が多いほど重症化する。しかし、Skewed XCIを再現したモデルは存在せず、適切な治療法の開発が進んでいない。一方、iPS細胞(iPSC)は疾患の解析に有用だが、通常の培養条件下ではXCIが破綻し、X連鎖疾患研究の障壁となっている。申請者らはXCI正常化技術を開発し、RTT-iPSC由来の2D神経分化モデルでMECP2-v1発現が神経発生異常を改善することを確認した。また、XCIモザイク脳オルガノイドを作製し、Skewed XCI状態の再現に成功した。本研究では、このモデルを基盤にMECP2-v1の発現時期・量を調整し、遺伝子治療の有効性を検証する。さらに、臨床データを活用し、治療適応患者のスクリーニング法の確立を目指す。