網膜色素変性（RP）は、有効な治療法がない遺伝性網膜変性である。我々は日本人RPの12％が保有するEYS-S1653Kfs変異に対するゲノム編集治療の開発に着手し、in vivo試験で目標のゲノム編集成功率を達成するなど順調に開発を進めていた。しかし、RP類縁疾患に対するゲノム編集遺伝子治療の治験結果から、前臨床試験に進む条件としたゲノム編集成功率の目標値を大幅に引き上げる必要が生じた。そのために本研究では、ゲノム編集に用いるCas9最適化とAAV変異体の検討などの改良を行い、ゲノム編集率の大幅な向上の安全性の両立を目指す。さらに、RP患者のレジストリを作成し、自然歴と視機能の予測を可能とする数理モデルの構築とそれを用いた最適な治療介入時期と臨床バイオマーカーの同定を実現する。
本年度は、Cas9最適化のためのスクリーニングに使用する細胞株とライブラリーを構築した。さらに使用するAAVベクターの変異体を含むカプシドについてin vivoレポーター実験により検討を行い、計画を前倒しして最適なカプシドを選定することができた。既に評価モデルは構築済であるため、Cas9最適化が完了次第、速やかにin vivo評価に移行することができる。RP患者のレジストリについては、順調にEYS-S1653fs患者のレジストリ登録を行っており問題はない。また、数理モデルを駆使して視野感度動態の解析を行ったところ、症例間のばらつきを考慮した推定が可能となり、視野感度の自然歴を再構築できた。今後、開発したシミュレーションによる臨床試験のデザインの検討を行っていくことで、理想的な臨床研究デザインの実現が期待できる。
本開発研究の基礎と臨床の双方向的なアプローチにより、他の治療にも応用できる新しいゲノム編集治療開発プラットフォームが誕生する可能性がある。