令和6年度は、福山型筋ジストロフィー（FCMD）に対する低分子化合物Mn007の薬効機序解明および誘導体の開発を中心に、臨床応用を見据えた基盤研究展開した。まず、Mn007が標的とするタンパク質の同定を目的に、ビオチン化Mn007を用いた約28,000種類のタンパク質に対するプロテインアレイによるスクリーニング結果より候補タンパク質の抽出と二次検証を完了した。また、CRISPRライブラリを用いたスクリーニングにより、Mn007によるマトリグリカン伸長に寄与する新規遺伝子の候補遺伝子群を抽出した。健常者由来のiPS細胞とFCMD患者由来iPS細胞とで、CRISPR-Cas9の系を用いてDNase1,2のノックアウトを試みた。今後は、これらの細胞にMn007を添加し、糖鎖修飾への影響を調べる予定である。
またMn007の分子構造に基づき、変異原性の少ない誘導体の合成と評価も行い、新たな化合物群の糖鎖伸長能を検討した。また福山型筋ジストロフィーの治療薬候補であるMn007の分子凝集性を明らかにした。このMn007を糖転移酵素であるLARGEに添加すると、その酵素活性が変化しうる結果を得た。いくつかの候補化合物は特許出願に向けた条件を満たす可能性が示された。また支援をいただき薬効をもつ化合物の検討を行った。さらに、iPS細胞および疾患モデルマウスを用いた薬効評価系を確立した。
加えて、RNAシークエンシングを用いた発現解析をiPS細胞やHEK293T細胞において実施し、薬理応答性を示す遺伝子クラスターの特定に取り組んだ。その結果、O-Man型糖鎖の生合成機構に関わる糖鎖修飾酵素の一つや、上皮間 葉転換、低酸素状態に関わる遺伝子群の発現が変化していることがわかった。全体として今後の低用量投与実現に向けた足掛かりを得た。これらの成果により、本研究は低分子糖鎖治療薬の創出に向けて前進した。