細胞外小胞（extracellular vesicles: EV）は、脳疾患における血液バイオマーカーとしての利用可能性が注目されている。本研究では、アルツハイマー病（AD）のアミロイド病理形成に関与すると示唆されているAβ結合型糖脂質GM1を含有する細胞外小胞（Aβ-GM1-EV）を、新規血漿バイオマーカー候補として取り上げ、脳内アミロイド蓄積やAD抗体治療の効果評価への応用可能性を検討することを目的とした。また、血液中に低濃度で存在する特定EVを高感度に検出するために、独自に開発したデジタルEV計測システム「idICA（immunodigital invasive cleavage assay）」を用いた。令和6年度には、Aβ-GM1-EV検出用idICAシステムの改良およびパイロット臨床試験を実施した。本年度の取り組みとしては、検出抗体とEVの結合ステップの条件最適化を行うとともに、EVをビーズから脱離させ、抗体が結合したEVのみを検出デバイスへ送液するシステムを構築した。この新システムにより、従来型のようにビーズとEVの複合体をそのまま送液する方式と比較して、より正確なEVの定量が可能となった。さらに、新型idICAを用いてAD患者および軽度認知障害（MCI）対象者を含む30例の血液検体を測定した結果、idICAスコアと脳内アミロイドレベルとの有意な相関が確認された。加えて、来年度に実施予定のidICA性能評価試験に向けて、アミロイドPETスコアに紐づくAD患者およびMCI対象者の血液検体の収集を進めているほか、AD抗体治療効果を評価するためのMCI対象者への治療薬投与および血液検体の収集も順次進行中である。