本開発研究では、外部CMOで作製された臨床用TCR-iPS細胞を用いた試験製造を研究室内で実施し、必要な品質項目を策定する。一方、京大病院のGCTP準拠CPC（CCMT）において臨床用TCR-iPS細胞から臨床用グレードの再生キラーT細胞をで製造し、非臨床試験に供する。CCMT内での試験製造運用は2022年度から開始しており、本申請研究では、初年度には臨床試験に使うT細胞の原材料として用いる医療用のTCR-iPS細胞株を導入する。iPS細胞からキラーT細胞を作製するステップは、i)iPS細胞からヘマンジオブラスト、ii)ヘマンジオブラストからCD4CD8共陽性（double positive: DP）細胞、iii) DP細胞からCD8陽性キラーT細胞、という３つの段階に分けられ、それぞれの段階の最終産物は凍結保存が可能である。以前の計画ではTCR-iPS細胞を本製造のマスターセルバンク（MCB）として使用するとしていたが、MCBから最終産物のキラーT細胞までの手順が非常に多く、TCR-iPS細胞はMCBには適さないと考えた。そこで、今回の臨床試験では、DP細胞をMCBとして扱う事にした。３年間の計画の中で、1年目はTCR-iPS細胞のCCMTへの導入、2年目はステップ(i)(ii)(iii)を終了し最終産物であるキラーT細胞の安全性と有効性の検定を開始、3年目には有効性の検定を終了し検定結果に基づいてSOPを確定、という計画を立てている。
初年度は、CCMT内に臨床用TCR-iPS細胞株を導入した。導入後、増幅して、数十本に分注し、ワーキングセルバンクを作製した。並行してCCMT外でステップ(i)を進めるための培養法を確定するための実験を行い、ステップ(i)のSOPの作成を開始した。