本課題では、HTRA1、COL4A1、NOTCH3遺伝子変異を有する遺伝性脳小血管病（cerebral small vessel disease: CSVD）患者由来の疾患特異的iPS細胞を樹立し、血液脳関門（blood-brain barrier: BBB）構成細胞である内皮細胞および平滑筋細胞へ分化誘導することで、各遺伝子変異に特異的なBBB機能破綻の分子基盤を明らかにすることを目的とする。令和6年度には、性別および遺伝子型に多様性を有するHTRA1関連CSVD患者5例（p.Arg302Ter×2、p.Arg302Gln、p.Arg302Ser、p.Arg166Pro）の血液検体を収集し、認知機能評価および頭部MRIを含む包括的臨床データを取得した。令和5年度の成果と併せ、CADASIL、COL4A1関連疾患、HTRA1関連CSVDすべてにおいて計画通りのiPS細胞樹立を達成した。また、成人発症白質脳症レジストリ班（代表：小野寺理）との連携体制を構築し、症例拡充の基盤も整備した。さらに、iPS細胞からのヒトアストロサイト分化誘導法に関する技術移転を実施し、従来困難であった迅速かつ高効率なアストロサイト誘導法の新規開発にも成功した。独自の分化誘導法により、疾患特異的iPS細胞から誘導された内皮細胞・平滑筋細胞において、背景遺伝子ごとにBBBの易漏出性およびその分子病態に顕著な差異が生じることを同定した。特にCOL4A1変異においては、平滑筋細胞内でのコラーゲンIVの異常蓄積と分泌障害を確認し、脈管形成異常の関与が示唆された。現在、各遺伝子由来細胞におけるRNAシークエンス解析および平滑筋細胞由来分泌因子のセクレトーム解析を進めており、遺伝子変異別に異なるBBB破綻メカニズムの解明に取り組んでいる。