本年度は、口腔粘膜上皮細胞の高効率な誘導のためのレポーターiPS細胞を樹立した。樹立したiPS細胞を用いて、口腔上皮の高効率な誘導法に向けて、口腔粘膜分化に機能的なシグナルの同定として成長因子および低分子化合物のミニスクリーニングをおこなった。スクリーニングの結果、分化誘導10日目でPITX2陽性の口腔上皮の誘導が確認され、その誘導効率は約95％と高値であった。誘導したヒトiPS細胞由来の口腔粘膜上皮は、Bulk RNA-seqの結果、マウス胎生期口腔粘膜上皮に発現がみられるSOX2などの遺伝子群の発現上昇が確認され、遺伝発現プロファイルは高度に類似した口腔粘膜上皮を高効率にヒトiPS細胞より誘導することが可能となった。また、この遺伝子発現プロファイルより胎生期ヒト口腔上皮細胞に発現する転写因子やレセプターを同定することができた。誘導した口腔上皮はマイクロウェルプレートへの播種によりスフェアを形成することが可能で、今後はこの口腔粘膜スフェアから唾液腺が誘導可能か否かを検討する予定である。
また、ミニスクリーニングで得られたシグナル経路を利用して、唾液腺オルガノイドの分化誘導プロトコルを改変することで、分化誘導初期に高効率に口腔粘膜上皮を分化誘導させることができた。