がんでは病態と関連したプロテアーゼの活性異常が報告されており、疾患関連酵素の活性化が引き金となって生じた異常な切断タンパク質は、患者の血流中を循環している。血流中の異常な切断パターンは、病変部の酵素の異常を外挿していると考えられる。そこで、本研究開発は、独自開発の特許技術である血液中に循環するタンパク質末端の異常切断プロファイル（terminome）解析法を利用して、がん病巣微小環境のプロテアーゼ活性異常を外挿し、消化器がん早期発見に資する新規バイオマーカーを探索・同定することを目的とする。令和６年度は、同一SOPで収集している血漿サンプルストックからterminome profile作成に適した大腸がん、年齢性別をマッチした健常者の解析血漿サンプルを抽出し総計約200例のサンプルセットの作成した。作成したサンプルセットの末端ペプチを濃縮し、質量分析による測定、およびデータ解析を行い、大腸がんおよび健常者のterminome profileの取得した。取得した大腸がんおよび健常者のteminome profileを用い、マーカー候補ペプチドの抽出を行った。同定された末端ペプチドに対してquality checkやnormalizationの処理を行い、分布を比較解析を行った結果、大腸がん患者血漿中で有意に変動する末端ペプチドとして8ペプチドを同定した。ROCの最大AUCは0.86であった。また、２つの末端ペプチドの相間を検討した結果、異なるタンパク質由来の末端ペプチドの相間は低く、検出を保管し、組み合わせによりAUCが上昇することが見いだせた。