これまでにCD19に対するCAR-T細胞で示してきた、遺伝子A、遺伝子BのCRISPR/Cas9による同時ノックアウトに伴うT細胞の機能変化が、抗メソテリンCAR-T細胞においても同様に見られることを確認した。In vitroにおいて、連続抗原刺激を加えた際のサイトカイン分泌の維持に加えて、未分化メモリー形質の維持を確認した。さらに、メソテリン陽性腫瘍細胞株AsPC1をNSGマウスに皮下移植する実験系を用いて、コントロールCAR-T細胞との比較における治療効果の優位性を確認した。また、一定時点で腫瘍組織を摘出して、腫瘍に浸潤するCAR-T細胞のRNAシークエンスを行い、エフェクター関連の遺伝子変化を確認した。また、in vitroの実験系で、遺伝子ノックアウトに伴うCAR-T細胞のエピゲノム変化をATACシークエンスにより解析し、遺伝子A,B双方ともに広範なクロマチン開閉状態の変化を確認した。これに加えて、遺伝子A, Bの発現をCRISPR/Cas9によるゲノム編集を使わずに抑制する方法の開発を目指した。特定の遺伝子発現を抑制するためにshort hairpin RNAやmiRNA配列が用いられることが一般的であることから、これらの配列をベクターに組み込んで両遺伝子を効率的にノックダウンするベクター構造を検討し、有効な配列を同定した。このノックダウンベクターで作製したCAR-T細胞はノックアウトと同様にメモリー形質の維持、サイトカイン分泌の維持を示すだけでなく、in vivoでも高い生存能を示した。
これとは別に、婦人科腫瘍オルガノイドの樹立、in vivoで使用できるモデルの準備を進めた。これまでにゼノグラフトモデルで生着可能な症例を5例同定しており、CARの標的抗原としてはHer2が高発現であることを確認した。ルシフェラーゼ遺伝子を安定発現