ペンタトリコペプチドリピート（PPR）蛋白は、植物で発見されたRNA塩基配列特異的に結合する核酸結合蛋白である。A,C,U,G各塩基に結合するPPRモチーフを組み合わせることで、あらゆるRNA標的配列に特異的に結合する分子を創生できる。本研究では、異常RNAが原因となる難治性筋疾患、神経変性疾患を対象に、新たな創薬モダリティとしてPPRを用いた治療薬開発研究を行う。これまでに、筋強直性ジストロフィー（DM1）の原因となる異常伸長CUGリピートRNAに結合するPPR（CUG-PPR）の標的RNA結合モチーフの最適化を完了し、DM1細胞モデルおよびDM1マウスモデルで異常RNA毒性低減効果を確認している。また、マウス全身臓器でPPRの発現誘導が良好なAAVセロタイプとしてAAV9を選定しており、AAV9搭載型CUG-PPR（AAV9-CUG-PPR）をマウス尾静脈投与し、異常RNA抑制効果について投与用量反応性（dosing study）および治療効果持続性（time-course study）を確認している。またAAV9-CUG-PPR の効果をさらに向上するため、AAV9-CUG-PPRプロモーターの改良を行い、標的臓器での高いCUG-PPRの発現を確認し、DM1モデルマウスで異常RNA抑制効果が飛躍的に高まったことを確認した。今年度はこれに引き続き、プロモーター改良型AAV9-CUG-PPRの筋変性抑制効果を実証した。さらにマウスを用いた安全性予備試験も実施した。また、機能分子融合型PPRとしてRNase融合CUG-PPRをAAV9ベクターをもちいて疾患モデルマウスへ投与し、その効果を検証した。