PRDM14遺伝子を標的とした複数の候補配列の中から、遺伝子抑制活性および細胞・動物モデルにおける抗腫瘍効果を指標に、最も高い有効性を示す配列を選抜した。この配列に関して網羅的に評価した結果、特定の化学修飾を行ったsiRNAにおいて、配列依存的なオフターゲット作用が極めて少ないことが確認された。
次いで、これらの化学修飾型を用いた次世代型siRNA複合体（uPIC）における血中滞留性を検討したところ、無修飾型や先行剤型に比較して化学修飾型はさらに長時間にわたる血中安定性が認められた。uPIC化によって、いずれの修飾型siRNAにおいても、担がんマウスモデルでの腫瘍局所集積性が大きく向上し、特定の化学修飾型で顕著であった。
卵巣がんモデルにおいて、2種の化学修飾型PRDM14 siRNA複合体による治療効果を検討した結果、いずれもコントロール群やsiRNA単独投与群に比して優れた抗腫瘍活性を示した。腫瘍増殖抑制効果は特定の化学修飾型が最も高いものの、比較検討した2種の化学修飾型siRNAによるuPICにおいて生存期間に有意差は認められなかった。
さらに、標的指向性向上を目的として、PRDM14 siRNAに対して2種のリガンドをコンジュゲートするアプローチを展開し、リンカー構造を検討のうえ、合計3系統の合成に成功した。血中滞留性の比較では、いずれも特定の化学修飾型siRNAが最も優れていたが、リガンドについては一方は8時間以降に血中濃度が急速に低下したのに対し、他方はさらに長時間に渡り安定した血中濃度維持が認められた。
加えて、前者のリガンド体においてリンカー構造を比較した。その結果、特定構造を有する構造の方がより高い腫瘍集積性を示した。最終的に、腫瘍局所へのsiRNAの腫瘍集積性を考慮し、次年度に得られる抗腫瘍効果により非臨床に進む剤型が確定される。これらの知見は今後のsiRNA医薬開発に向けた有用な基盤情報となった。