感染研_鈴木は、第２世代四価キメラ型VLP抗原設計・発現評価を行い、デングウイルス(DENV)の3つの血清型について最適化されたデザインの開発に成功した。DENV4については、初回のin silico解析結果から得られた候補で発現量の改善が認められず、デザインコンセプトを変更し、再設計を実施している。現在、恒常発現系を構築に向けて作業を進めている。第２世代四価キメラ型VLP抗原精製系の確立については、DENV1、2に関して一過性発現系を用いた精製方法の初期検討は完了した。
感染研_高橋は、抗DENVヒトモノクローナル抗体パネルの整備および抗体への結合性評価を進めている。加えて、ヒトモノクローナル抗体を用いたエピトープ構造解析系の開発を実施している。R6年度はデング熱流行地域由来のヒト検体を用いて、野生型抗原とワクチン候補抗原の抗原性評価に利用可能なモノクローナル抗体パネルの整備を進めた。
京都大学_橋口は、デザイン抗原タンパク質を用いた動物免疫後の血清に対するin vitroアッセイ抗原の発現・精製を実施した。DENV1-4 型に加えて、日本脳炎ウイルスやウエストナイルウイルスの相同抗原も精製タンパク質として得ることに成功し、研究班内に供給した。
感染研_黒須は、DENV感染マウスモデルを用いたin vivo ADE試験を実施し、感染マウス血清を用いた抗血清によるADEアッセイのための感染マウス血清を準備した。また、第２世代単価抗原発症防御試験を実施し、防御する条件での血清中和抗体価を決定した。
北大_田畑は、抗体依存性感染増強(ADE)を惹起しないDENV由来のVLP抗原作製を目的とし、変異を導入したキメラ型DENV抗原を作製・評価した。DENV4型を除くすべての血清型においてCapsidとの共発現によりVLPの発現量が上昇することを確認した。また、生産効率改善のための培養法最適化を検討した。異なる温度で培養したHEK293T細胞における遺伝子発現解析及び翻訳後修飾因子の阻害化合物ライブラリーによるスクリーニングを実施し、VLP発現を増強させる宿主因子を同定した。