千葉大学園芸学は朝日工業社との協力により、MucoRice-CTB 19AのGLPレベルのの２ロットの製造し、平米あたり1000g以上の収穫を得て、GMP原薬製造での規格値の検討に必要な精米率を80％に決定した。GLP用原薬の製造は令和7年6～7月に完了見込みである。イネ栽培及びGMP製剤化ユニット導入は千葉大柏の葉キャンパスに建設中のバイオヘルスイノベーションハブ棟に設置する方針に変更し、施工業者を入札確定させた。完成はR7年8月頃の予定である。製剤規格値に関係する粒度はCMIC社で検討を行い、200μm前後で決定の見込みである。
千葉大学医学部は附属病院にてヒト腸管洗浄液の採取に関する男性２名による臨床研究を令和６年５月に千葉大附属病院消化器内科で実施した。手法は大腸内視鏡検査で用いられる方法に準拠して、下剤を投与して腸内を洗浄し、すべての水性便及び内視鏡での腸管洗浄液を採集し、確立している高感度化学発光ELISAによるヒトIｇA等の定量を行った。続いて令和６年11月に男性４名、女性３名よる臨床研究を実施した。前回の試験で確立した腸管洗浄液採集法を用いて連続する初期水性便を用いてIｇA等及びCTB特異的IgA等、の定量し、測定値は文献値と大枠で大差はなかった。また男女差で有意差はなかった。CTB特異的IgA量は全IgAの1/500程度でこれがバックグランドと考えられた。薬事関連で、PMDAとの事前面談を4月及び11月実施した。質問事項は(1)MucoRice-CTB19Aの品質が51Aとほぼ同一であれば、非臨床データ特に毒性データは必要ないということ。(2)この場合には19Aでの治験はFirst-in Humanでなく治験申請も簡略化される。現在データをまとめ、R７年９月の対面助言を目指している。
愛媛大学ではインフル産生MucoRice については、CTB-Flu-M2e遺伝子導入系統を6ライン、CTB-Flu-M2e-M2e-M2e遺伝子導入系統を3ライン取得できた。RSウイルスワクチン産生MucoRice についてはCTB-RSV_A遺伝子導入系統を12ライン取得できた。マーカーフリーMucoRice生産に関しては、形質転換体を作出しPCRによる遺伝子導入個体の確認を行っている。京都府立大学では、RSV-A遺伝子導入株は34個体、RSV-Bのそれは36個体を得た。RSV-B7系統の種子数が多い系統のT0種子から発現確認し、その内T1個体を10個体育成した。千葉大学ではRSVおよびインフルエンザMucoRiceワクチンで誘導されるワクチン有効性評価のための解析系構築を進めた。具体的には、抗原特異的抗体価を測定するELISA系を確立し、ワクチン抗原となるペプチドの免疫反応性を、マウスの筋肉内投与で確認した。また、本評価で用いるFcγR欠損マウスの導入も進めた。
農研機構では更新前後のMucoRice-CTB19A種子バンクのゲノム解析を行い、導入遺伝子の塩基配列と挿入位置が両者で完全一致していることを確認した。効率的なコ・トランスフォーメーションを可能とするテスト用ベクターをイネに導入した結果、選抜マーカーと目的遺伝子が同時に導入された再分化植物が得られ、その当代種子を収穫した。開花後2週目の未熟種子を収穫して無菌播種することで、次世代種子が早く得られることがわかった。