創薬コンセプトを検証するために、ドキシサイクリン誘導性にCas9を発現する膠芽腫由来細胞を作製した。この細胞にイオンチャネルXのgRNAを導入し、ドキシサイクリン誘導性イオンチャネルX（KO）細胞を樹立した。当該イオンチャネルX誘導的KO細胞における細胞増殖能を評価した結果、細胞増殖の抑制が認められた。さらに、スフェア培養下においては、細胞増殖が約40％に抑制された。これらの結果は、イオンチャネルXが膠芽腫由来のがん幹細胞様細胞の生存に関与している可能性を示唆する。次に、Ca蛍光試薬（FLIPR）を用いた細胞内カルシウム流入量の測定系を構築し、本評価系において合成済みの化合物群による細胞内カルシウム濃度の変動を検討した。その結果、化合物K3およびK110の投与により、細胞内カルシウム濃度の上昇は認められなかった。また、ヒット化合物群の薬理作用を確認する目的で、膠芽腫由来がん幹細胞様細胞を接種した担癌マウスモデルを作製した。合成済みの化合物K86を経口投与し、腫瘍増殖に対する効果を評価したが、有効性は確認されなかった。さらに、ヒット化合物群の体内動態の改善を目的として、in vivoにおける薬物動態（PK）試験を実施した。得られた試験結果をもとに新規化合物の合成を展開した。