NCYMについては、野生型がKras変異と協調して胆管発がんを促進するのに対し、東アジア型SNPは逆に発がんを抑制することを前年度までに示したため、この分子機構の解明を試みた。NCYM野生型過剰発現とKras変異導入によりGSK3β活性が阻害され、その基質であるオートファジー制御因子が核内に蓄積した。さらに、Kras変異導入で誘導される細胞死がNCYM野生型の存在下では抑制されるのに対しSNP(N52S, L63P, V71D)では抑制できずオートファジー阻害が観察された。また構造解析からNCYM標的候補薬はNCYM野生型をNCYM-SNP型へ構造変換することが示され、この候補薬のNCYM発現オルガノイドへの投与によりGSK3β阻害、凝集塊を伴うオートファジー阻害が誘導された。以上より、NCYMはKrasが誘導する細胞死を抑制することで発がんに寄与すること、NCYM阻害剤はNCYM野生型を細胞死抑制能を欠いたSNP型に変換することで薬効を示すことが示された。MYCNについては、東大創薬機構コアライブラリーおよび理研NPDepo天然化合物バンクを用いたケミカルスクリーニングにより、肝がん細胞の細胞死を特異的に誘導する複数のMYCN阻害剤を同定し、類縁体の評価から構造活性相関を明らかにした。ゲノムワイド機能欠損解析とマルチオミクス解析により薬剤の作用機序を解明し論文を発表した。また、トランスポゾン遺伝子発現ベクターシステムを用いて、NCYM野生型および日本特有のNCYM-SNP(V71D)を過剰発現させ、肝がんの発がん及び治療応答性への影響を評価した。肝細胞がんにおいて、神経芽腫とは異なるGSK3β非依存的なNCYMによるMYCNタンパク質分解の新たな制御機構を見出した。3種類のヒト肝がん細胞株を用いて培養系とXenograft系においてNCYM 阻害薬PGV-1処理を行い、MYCN, NCYM, β-catenin発現量への影響を評価した。さまた、MYCN/NCYMの発現量を増加させたヒト肝がん細胞株を作製してPGV-1に対する感受性の変化を検討した。さらに、PGV-1の標的候補因子とNCYMの関係を調べるために、PGV-1の標的候補因子とそのパートナー分子間で組み換えタンパク質を用いたHTP解析の系を確立し、NCYM組み換えタンパク質を導入して効果を検証した。