課題詳細 | AMEDfind

研究課題情報

課題管理番号

24fk0310507h0003

統合プロジェクト（二期）

疾患基礎研究プロジェクト<第二期>

事業名

肝炎等克服実用化研究事業

タグ（2024）

研究開発目的：治療に関する研究

研究の性格：医薬品開発<新規化合物>

研究モダリティ：中分子医薬品－天然物・誘導体

開発フェーズ：基礎

ICD-10大分類：消化器系の疾患

対象疾患領域：感染症 , がん

特記的事項：病原体の研究

補足確認：治療

タグ（2023）

研究開発目的：治療に関する研究

研究の性格：医薬品開発<新規化合物>

研究モダリティ：中分子医薬品－天然物・誘導体

開発フェーズ：基礎

ICD-10大分類：消化器系の疾患

対象疾患領域：感染症 , がん

特記的事項：病原体の研究

補足確認：治療

タグ（2022）

研究の性格：生命・病態解明等を目指す研究

開発フェーズ：基礎的

承認上の分類：医薬品

対象疾患：その他

疾患領域：感染症

開発目的：予防・健康 , 治療 , 生活の質<QOL>

代表研究機関

国立大学法人神戸大学

研究代表者

(2024) 勝二郁夫, 国立大学法人神戸大学, 大学院医学研究科附属感染症センター・教授

(2023) 勝二郁夫, 国立大学法人神戸大学, 大学院医学研究科附属感染症センター・教授

(2022) 勝二郁夫, 国立大学法人神戸大学, 大学院医学研究科附属感染症センター・教授

研究期間

2022年度 - 2024年度

課題への総配分額

305,250 千円

研究概要（2024）

本研究では、HERC5の阻害剤によるHBV増殖の制御を解析する。Hz-6dの新規誘導体を合成し、その抗HBV活性をレポーターHBV(HBV/NL)やHBV培養細胞で解析する。また、新規レポーターHBV(HBV/NL+)を用い、1)HBV複製後期過程に関与する新たな細胞内宿主因子を探索する、2)得られた細胞内宿主因子の解析から、新たなHBV感染後期過程の分子機序の解明を行う、3)それらの分子機序の解明に立脚した抗HBV薬開発のための創薬研究を行うことを目的とする。また、1. レポーターHBV後期過程評価系を用いた、siRNAに対するハイスループットスクリーニング評価系の構築と最適化を行う。特に、HepG2細胞内での組換えレポーターHBVの産生量を高めるために、Nano-Luc(NL)レポーター遺伝子を発現するHBVプラスミドとそのヘルパープラスミドの最適な導入比率を決定する。さらに(i)ヒトiPS細胞から肝細胞への各分化段階や分化後に培養条件を変えた状態においてレポーターHBV(HBV/NL)を導入し、定量的に評価できる系を確立する。(ii)遺伝性疾患患者由来のiPS細胞からの肝分化を行い、各種マーカー遺伝子の発現を調べる。

研究概要（2023）

本研究では、HERC5の阻害剤によるHBV増殖の制御を解析する。Hz-6dの新規誘導体を合成し、その抗HBV活性をレポーターHBV(HBV/NL)やHBV培養細胞で解析する。また、新規レポーターHBV(HBV/NL+)を用い、1)HBV複製後期過程に関与する新たな細胞内宿主因子を探索する、2)得られた細胞内宿主因子の解析から、新たなHBV感染後期過程の分子機序の解明を行う、3)それらの分子機序の解明に立脚した抗HBV薬開発のための創薬研究を行うことを目的とする。また、1.レポーターHBV後期過程評価系を用いた、siRNAに対するハイスループットスクリーニング評価系の構築と最適化を行う。特に、HepG2細胞内での組換えレポーターHBVの産生量を高めるために、Nano-Luc(NL)レポーター遺伝子を発現するHBVプラスミドとそのヘルパープラスミドの最適な導入比率を決定する。さらに(i)ヒトiPS細胞から肝細胞への各分化段階や分化後に培養条件を変えた状態においてレポーターHBV(HBV/NL)を導入し、定量的に評価できる系を確立する。(ii)遺伝性疾患患者由来のiPS細胞からの肝分化を行い、各種マーカー遺伝子の発現を調べる。

研究概要（2022）

本研究では、HERC5の阻害剤によるHBV増殖の制御を解析する。Hz-6dの新規誘導体を合成し、その抗HBV活性をレポーターHBV(HBV/NL)やHBV培養細胞で解析する。また、新規レポーターHBV(HBV/NL+)を用い、1)HBV複製後期過程に関与する新たな細胞内宿主因子を探索する、2)得られた細胞内宿主因子の解析から、新たなHBV感染後期過程の分子機序の解明を行う、3)それらの分子機序の解明に立脚した抗HBV薬開発のための創薬研究を行うことを目的とする。また、1.レポーターHBV後期過程評価系を用いた、siRNAに対するハイスループットスクリーニング評価系の構築と最適化を行う。特に、HepG2細胞内での組換えレポーターHBVの産生量を高めるために、Nano-Luc(NL)レポーター遺伝子を発現するHBVプラスミドとそのヘルパープラスミドの最適な導入比率を決定する。さらに(i)ヒトiPS細胞から肝細胞への各分化段階や分化後に培養条件を変えた状態においてレポーターHBV(HBV/NL)を導入し、定量的に評価できる系を確立する。(ii)遺伝性疾患患者由来のiPS細胞からの肝分化を行い、各種マーカー遺伝子の発現を調べる。

研究成果情報

2024

2023

2022

成果の概要

学会誌・雑誌等における論文一覧

1. Murayama A, Igarashi H, Yamada N, Aly HH, Toyama M, Isogawa M, Shimakami T, Kato T. Exploring the tolerable region for HiBiT tag insertion in the hepatitis B virus genome.mSphere, 2024, e0051824. doi: 10.1128/msphere.00518-24.

2. Nishitsuji H, Naito Y, Murakami Y, Sugiyama M, Mizokami M, Shoji I, Murata T, Shimotohno K. Identification of glycogen synthase kinase 3alpha/beta as a host factor required for hepatitis B virus transcription using high-throughput screening. Hepatology, 2025, in press, doi: 10.1097/HEP.0000000000001239.

3. Muchar A, Onomura D, Ding D, Nishitsuji H, Shimotohno K, Okada S,Ueda K, Watashi K,Wakita T, Iida K, Yoshiyama H, and Iizasa H. MicroRNA-3145 as a potential therapeutic target for hepatitis B virus: inhibition of viral replication via downregulation of HBS and HBx. Frontiers in Microbiology 2025,(10.3389/fmicb.) doi: 10.3389/fmicb.2024.1499216.

4. Kimura R, Hayashi Y, Sato-Fujimoto Y, Miyakawa K, Shirato K, Nagasawa K, Mizukoshi F, Tsugawa T, Ryo A, Kimura H. Reinfection Mechanisms of Various Viruses and Their Societal Implications. Disease Biology, Genetics, and Socioecology. 2025, 1(1), 4. doi: https://doi.org/10.53941/dbgs.2025.100004

5. Abe-Chayama H, Kawase T, Ichinohe T, Ishida Y, Tateno C, Hijikata M, Chayama K. Hepatitis B virus-specific human stem cell memory T cells differentiate into cytotoxic T cells and eradicate HBV-infected hepatocytes in mice. FEBS Lett. 2024, 598(11), 1354-1365. doi: 10.1002/1873-3468.14842.

6. Duehren S, Uchida T, Tsuge M, Hiraga N, Uprichard SL, Etzion O, Glenn J, Koh C, Heller T, Cotler SJ, Oka S, Chayama K, Dahari H. Interferon alpha induces a stronger antiviral effect than interferon lambda in HBV/HDV infected humanized mice. Virus Res. 2024, 349, 199451. doi: 10.1016/j.virusres.2024.199451.

7. Zhang M, Mouzannar K, Zhang Z, Teraoka Y, Piotrowski J, Ishida Y, Tateno-Mukaidani C, Saito T, Abe-Chayama H, Chayama K, Liang TJ. Hepatitis B virus genotypes A1 and A2 have distinct replication phenotypes due to polymorphisms in the HBx gene. PLoS Pathog. 2025, 21(1), e1012803. doi:10.1371/journal.ppat.1012803.

8. Shi Z, Tsuge M, Collier N, Takeuchi Y, Uchida T, Rutter CM, Teraoka Y, Uprichard S, Ishida Y, Tateno C, Ozik J, Dahari H, Chayama K. Modeling of hepatitis B virus infection spread in primary human hepatocytes. bioRxiv [Preprint]. 2025, 2025.02.05.636596. doi: 10.1101/2025.02.05.636596.

学会・シンポジウム等における口頭・ポスター

1. "Hepatitis B virus mutations associated with hepatocellular carcinomas are regulated by HLA genotype." Masaya Sugiyama, EASL Cogress 2024 Milan Italy 2024/06　国外、ポスター

国外 / ポスター

2. HLA genotype regulates hepatitis B virus mutations associated with hepatocellular carcinoma. Masaya Sugiyama, Nao Nishida, Aiko Sakai, Katsushi Tokunaga.AASLD San Diege USA 2024/11　国外、ポスター

国外 / ポスター

3. A novel bile acid derivative suppresses hepatitis B virus internalization by interfering with NTCP oligomerization. Suwardana GNR, Abe T, Kuroki D, Deng L, Matsui C, Takeda N, Ueda M, Hirata T, Yamada T, Hatano M, Wiriyasermkul P, Nagamori S, Shimotohno K, and Shoji I. 第77回日本細菌学会関西支部総会, 2024年11月30日, 大阪, 口頭発表.

国内 / 口頭

4. A novel bile acid derivative suppresses hepatitis B virus internalization by interfering with NTCP oligomerization. Suwardana GNR, Abe T, Kuroki D, Deng L, Matsui C, Takeda N, Ueda M, Hirata T, Yamada T, Hatano M, Wiriyasermkul P, Nagamori S, Shimotohno K, and Shoji I. The 71st Annual Meeting of the Japanese Society for Virology, 2024年11月4-6日, Nagoya, 口頭発表.

国内 / 口頭

5. Production of HBV reporter virus in HBV pgRNA-launched cells likely to be conducted via cccDNA pathway, at least in part. Yamasaki M, Nishitsuji H, Takizawa N, Murata T, Iwata Y, Sugiyama M, Mizokami M, Shoji I, and Shimothono K. The 71st Annual Meeting of the Japanese Society for Virology, 2024年11月4-6日, Nagoya, 口頭発表.

国内 / 口頭

6. Genome-wide CRISPR/Cas9 library screening identified HPSE2 as an inhibitor for HBV attachment, 伊藤昌彦, 西辻裕紀, 下遠野邦忠, 鈴木哲朗, 第71回日本ウイルス学会学術集会, 2024/11, 国内, 口頭.

国内 / 口頭

7. ヒトiPS細胞からの肝分化誘導系を用いたHBV感染機構の解析、小柳三千代、阿部隆之、西辻裕紀、立花太郎、勝二郁夫、下遠野邦忠、日本ウイルス学会、2024/11/4-6、国内、ポスター発表

国内 / ポスター

8. HBV複製に関与するPCNA分子の機能的意義の解析、阿部隆之、Yeshua Putra Krisnugrah、Dewa N. M. Adyaksa、西辻裕紀、鄧琳、松井千絵子、下遠野邦忠、勝二郁夫、第71回日本ウイルス学会学術集会、2024/11/4-6、国内、口頭

国内 / 口頭

9. Cathepsin F is required for HBV/HDV entry. Mahmoud AA, Hussein SA, Gad SA, Kamal E, Kato T, Murayama A, Shoji I, Isogawa M, Wakita T, Moi ML, Aly HH. The 71st Annual Meeting of the Japanese Society for Virology, 2024年11月4-6日, Nagoya, 口頭発表.

国内 / 口頭