RASはがんの主要ドライバーであるものの、分子標的薬で認可されているのはG12C変異型のみで、残る約88％を占めるnon-G12C変異型RASには有効薬がない。難治性膵がん・大腸がん・造血器腫瘍など広範な腫瘍に同変異が存在するため、新規阻害剤の開発ニーズは極めて高い。本研究開発では申請者らが2018年から開発を進める細胞内侵入型キメラタンパク質「Protein X」に着目し、非臨床試験移行に必須の四課題を検証した。
(1) 治療対象とするRAS変異がんの選択 ― 免疫正常・免疫不全の17モデルを用いた薬効試験と腫瘍免疫プロファイリングを完了した。その結果、CT-26およびMC-38モデルで顕著な腫瘍退縮が生じ、完全寛解率が50 %以上、ΔT/ΔC比も大幅に低下した。投与量を25 mg kg^⁻¹に半減しても同等の抗腫瘍効果を維持した。興味深いことに、免疫不全BALB/C-nu/nu系では腫瘍退縮がほぼ消失し、さらにCT-26とMC-38をnu/nu系に移植した場合にも薬効が失われた。さらに、CD8枯渇抗体およびIFNγ中和抗体を前投与すると腫瘍壊死が完全に阻止されたことから、IFNγ^⁺CD8^⁺T細胞が主要薬効決定因子であることが示された。実際、6モデルの多項目FACS解析でもIFNγ^⁺CD8^⁺T細胞割合と腫瘍縮小率の強相関が確認され、同細胞群が定量的バイオマーカーとなる可能性が示唆された。
(2) 標準療法との比較 ―上記のように、本剤はCT-26およびMC-38モデルで顕著な腫瘍退縮を示し、薬効面での優位性は自明であったため、当初計画に予定していた標準療法との直接の比較試験は実施しなかった。一方、本年度に汎RAS阻害剤RMC-6236の構造とPhase 1/1b試験結果が公表されたため、RMC-6236を購入し、直接比較に向けた予備的検討を行った。
(3) 併用療法探索 ― 前年度に見出された翻訳後修飾阻害剤との併用をin vivoで検証したが、期待された相乗効果は認められなった。
(4) 製剤最終化 ― キャリア改良により細胞内移行効率を2桁以上向上させ、RD細胞で最小IC50＝80 fMを達成した派生体を取得し、RAS変異株と野生型株の間に有意差も認められた。