本研究の目的は、肉腫各種に発現する膜分子に対する抗体およびそれに抗がん剤を付加したantibody-drug conjugate（ADC）を開発することである。具体的な目標は、1)ヒト化・最適化クローンについてnon-GMPレベルのADC製造を行い、2)マウスモデルにおける抗腫瘍効果をnon-GLP試験で検証するとともに（非臨床POC取得）、GMP製造を終え、最終的に3)企業導出・臨床試験開始を目指すことである。昨年度までに、ヒト化開発リード抗体のペプチドマッピング、アミノ酸配列の解析、初期物性評価、構造安定性、および界面安定性を評価した。また、ヒト化開発リード抗体に基づくADCを作製し、骨肉腫担がんマウスモデルにおいて、陽性対照群と比較し濃度依存的な薬効を示すことを確認した。
今年度は下記の結果を得た。
・ヒト化開発リード抗体を産生する製造用のリサーチセルバンクを樹立した。
・ヒトの骨肉腫の生検病理材料および手術材料におけるMeflinの発現をin situ hybridizationおよび免疫組織化学で検証した。術前化学療法後の手術検体と術前化学療法前の生検検体を検証したところ、いずれも約7割の症例においてMeflinの高い発現レベルを認めた。骨肉腫の再発部位の手術検体11例を用いた検証では、その8割でMeflinの高い発現レベルを認め、原発巣に比してより高い発現レベルを示す症例もみられた。
・ヒト骨肉腫細胞を用いてMeflin分子の機能を調べた。Meflin高発現細胞では、化学療法抵抗性、薬物排出トランスポーターMRP1の発現、高い足場非依存性増殖能が誘導されること、すなわち、Meflinの発現はがん幹細胞の性質と関連が深いことが明らかとなった。
・骨肉腫担がんマウスモデルにおいて、近赤外蛍光色素を標識した抗ヒトMeflinモノクローナル抗体が特異的に腫瘍局所へ集積していることを生体イメージングシステムにて確認した。
・これまでの結果をまとめて論文を投稿した。