1. OXTRを標的とする人工核酸の抗腫瘍効果の解析：
In vitroの解析で、OXTRを標的とする非環状型核酸における血清ヌクレアーゼ耐性及び効果持続時間を確認し、in silico解析も実施し、オフターゲット効果が少ない配列を決定した。In vivoでは、選定した核酸を用いて、アテロコラーゲンにより中皮腫細胞株の腹腔移植マウスに投与したところ有意な腫瘍縮小効果を確認した。ヌードマウスの中皮腫細胞株胸腔移植モデルを用い、イオン液体化したOXTR-非環状型核酸を複数の投与濃度で胸腔内投与したところ、検討した最高濃度の投与を行った一匹のマウスで、腫瘍の明らかな縮小効果が認められたが、再現性が確認されなかった。この原因として、調製した核酸が不安定で、時間とともに物性が変化する可能性が見出され、当該事業期間における核酸用のイオン液体での検討を中止することとした。研究計画を変更し、腫瘍に集積をする工夫をしたLNPに搭載した非環状型核酸を中皮腫細胞株の胸腔移植マウスに経胸腔投与したところ、生存期間が有意に延長した。さらに、OXTR-非環状型核酸の分析プロトコルも確立した。
2. イオン化OXTR阻害剤の抗腫瘍効果の解析：
イオン液体化したOXTR阻害剤Xに関しては、中皮腫細胞株の胸腔移植マウスを用いて、投与方法・投与量の検討を重ね、有意な抗腫瘍効果・生存曲線の延長を、再現性をもって確認した。次に、イオン液体化OXTR阻害剤Xを胸腔内投与した中皮腫細胞株の胸膜播種マウスを用いて、中皮腫組織の微小領域をレーザーマイクロダイセクションによって採取し、CE-MS によってOXTR阻害剤Xの定量解析を行った。試料に含まれるOXTR阻害剤Xの絶対量を算出し、採取した微小切片の全てから検出した。イオン液体化OXTR阻害剤Xを胸腔投与1時間後の中皮腫組織内濃度は、IC50に相当する濃度であったが、2時間後以降は急速に低下していた。そのため、薬剤の投与方法の改良を行い、中皮腫細胞株の胸腔移植マウスにおいて有意な縮小効果を確認した。