本研究では、神経回路形成因子LOTUSの中枢神経系の再生阻害因子に対する抑制機能を利用した再生医療技術の開発を行った。LOTUSは内在性物質であるが、中枢神経系が損傷されるとその発現が減少するため、アデノ随伴ウイルス(AAV)を用いた遺伝子導入により補充する治療法である。本研究では、臨床応用に向けて動物実験でAAVの最適な投与経路と投与量を検討し、病態モデル動物における薬効試験、AAV投与による遺伝子治療法の安全性試験（GLP非臨床安全性試験）、及びヒトLOTUSのヒト細胞における効能検証を行った。更に、AAVベクターの試作製造とGMP製造の準備を進め、非臨床POC取得に必要な全過程を終えて医師主導治験申請準備を行った。
投与量に関し、損傷直後および損傷後5日目において想定される臨床投与相当量の髄腔内投与によって機能回復における有効性が認められた。次に、iPS細胞由来の培養ヒト神経細胞におけるヒトLOTUSの効能試験を行なったところ、ヒトLOTUSのヒトNogo受容体に対する拮抗作用を確認できた。他方、研究協力者の（株）遺伝子治療研究所の協力の下、ラットを用いた26週間経過観察による非臨床安全性GLP試験を実施し、全ての検査項目において遺伝子導入によるLOTUS過剰発現の安全性が確認された。また、ベクター製造に関してHEK293細胞を用いて浮遊培養法の検討を行って大量製造を試みたところ、治験薬の生物活性試験に十分な量のベクターを製造できることを確認した。今後、機能試験における検証後に研究協力者の（株）遺伝子治療研究所の協力を得てGMP製造を開始する予定としている。
最後に、治験協力者を含めて治験推進のための班会議を行い、CROの選定及び委託業務範囲の確認をして治験プロトコルの文書作成を開始した。
以上の開発研究により、挫滅型脊髄損傷モデルマウスにおいてAAV-LOTUSの臨床投与量の髄腔内投与を損傷直後または損傷後5日目に行うことで、脊髄損傷後の運動および感覚機能の機能改善が認められ、またGLP安全性試験によって全調査事項における安全性が確認されたことから、この方法による治療法の有効性と安全性が確認され、治験準備として必要な前臨床試験の全てを完了した。