本研究では、ヒトiPS細胞由来ミエロイド細胞（iPS-ML）およびヒト初代ミクログリアを用いてHIV-1感染時の解析、またこれらのウイルス潜伏感染細胞株樹立を試み、潜伏感染ミクログリアモデルとしての可能性・有用性を検討した。また、研究分担者と共同で、マウスへの細胞移植系を検討していたが、前年度の実験では移植iPS-MLは脳では比較的早期に排除されており、現在は他の増殖型マクロファージ系細胞株で、定着・増殖の程度を検討中である。
【自身の研究成果】
・iPS-MLのHIV-1感染動態
引き続き、in vitroにおけるHIV-1感染時のiPS-MLの動態を解析した。iPS-ML及びMDMにおける、Vpr欠損及びVif欠損型ウイルスの産生を野生型と比較した。MDMにおいて欠損型のウイルス産生が野生型よりも低いことは記法の通りであるが、この差はiPS-MLにおいてより顕著に認められた。また、最近の潜伏感染細胞をlatentにしておく治療戦略に有用と考えられる、複数のlatency promoting agent （LPA）候補が報告されているが、いずれもHIV-1 感染MDMにおけるウイルスmRNAの発現を大きく低下させるには至らなかった。一方で感染iPS-MLでは明らかな低下が認められた。この低下はサイトカインM-CSFを培養から除くと完全に消失した。以上の結果は、iPS-MLがM-CSF依存的に増殖する事実を反映すると考えられる。
・HIV-1潜伏感染ミクログリアモデル樹立の検討
潜伏感染iPS-MLクローンを樹立するため、VSV-GでシュードタイプしたHIV-1株を感染させたのち、感染細胞（GFP⁺）をセルソーターで純化し、クローン化して培養を継続すると、半数以上が感染12日目までは細胞数十個以上からなるコロニーを形成した。また、ウイルスmRNAの発現も認められた。一方、感染細胞のプロウイルスを解析すると、感染後2日目でlarge internal-deletion型が出現し、8日目では完全長のものはほぼ検出されなかった。また、初年度より自己増殖を行うヒト由来初代ミクログリアの解析も行っており、これも同様にウイルスを感染させて培養を継続すると、1ヶ月以上プロウイルスを保持したまま増殖するクローンが多数得られた。これらもリザーバー研究に有用な新ツールになると期待される。