課題詳細 | AMEDfind

研究課題情報

課題管理番号

23ek0310016h0003

統合プロジェクト（二期）

疾患基礎研究プロジェクト<第二期>

事業名

腎疾患実用化研究事業

タグ（2023）

研究開発目的：治療に関する研究

研究の性格：医薬品開発<適応追加>

研究モダリティ：低分子医薬品<分子量<600>

開発フェーズ：臨床研究

ICD-10大分類：尿路性器系の疾患

対象疾患領域：生活習慣病<免疫アレルギー疾患、腎疾患を含む> , 老年医学・認知症

補足確認：治療 , 予後・生活の質<QOL>

タグ（2022）

研究の性格：生命・病態解明等を目指す研究

開発フェーズ：基礎的

承認上の分類：医薬品

対象疾患：その他

疾患領域：生活習慣病

開発目的：治療 , 生活の質<QOL>

タグ（2021）

研究の性格：生命・病態解明等を目指す研究

開発フェーズ：基礎的

承認上の分類：医薬品

対象疾患：その他

疾患領域：生活習慣病

開発目的：治療 , 生活の質<QOL>

代表研究機関

国立大学法人山口大学

研究代表者

(2023) 内海仁志, 国立大学法人山口大学, 大学院医学系研究科　器官病態内科学講座・助教

(2022) 内海仁志, 国立大学法人山口大学, 大学院医学系研究科　器官病態内科学講座・助教

(2021) 内海仁志, 国立大学法人山口大学, 医学部附属病院　第二内科・助教

研究期間

2021年度 - 2023年度

課題への総配分額

27,300 千円

研究概要（2023）

マウス疾患モデル(CKDモデルと蛋白尿モデル)においてダントロレンがCKDの進展・蛋白尿を抑制することを検証する。RyR2構造安定化に対する薬理的(ダントロレン慢性投与)・遺伝的介入(リアノジン受容体安定化マウス (RyR2 V3599K-KI))によってERストレスが軽減され、CKDの進展・蛋白尿が抑制されるかをin vivoで検証する。並行して、腎臓から糸球体/尿細管を単離し足細胞/尿細管細胞を培養する。培養細胞のレベルでER・カルシウム動態とERストレス応答をin vitroで評価し、足細胞/尿細管細胞におけるRyR2の役割を検証する。また、マウス疾患モデルの尿検体を用い、足細胞傷害を鋭敏に反映する尿中バイオマーカーを探索する。さらに、進行したCKD患者に対するダントロレンの有効性・安全性を評価する臨床試験の準備を進め、R5年10月から臨床試験を開始することを目標とする。

研究概要（2022）

マウス疾患モデル(CKDモデルと蛋白尿モデル)においてリアノジン受容体安定化薬がCKDの進展・蛋白尿を抑制することを検証する。RyR2構造安定化に対する薬理的(リアノジン受容体安定化薬慢性投与)・遺伝的介入(リアノジン受容体安定化マウス (RyR2 V3599K-KI))によってERストレスが軽減され、CKDの進展・蛋白尿が抑制されるかをin vivoで検証する。並行して、腎臓から糸球体/尿細管を単離し足細胞/尿細管細胞を培養する。培養細胞のレベルでER・カルシウム動態とERストレス応答をin vitroで評価し、足細胞/尿細管細胞におけるRyR2の役割を検証する。また、マウス疾患モデルの尿検体を用い、足細胞傷害を鋭敏に反映する尿中バイオマーカーを探索する。さらに、進行したCKD患者に対するダントロレンの有効性・安全性を評価する臨床試験の準備を進め、2023年4月から臨床試験を開始することを目標とする。

研究概要（2021）

マウスCKDモデルにおいてダントロレンがCKDの進展を抑制することを検証する。5/6腎臓摘出によりマウスCKDモデルを作成する。RyR2構造安定化に対する薬理的(ダントロレン慢性投与)・遺伝的介入(リアノジン受容体安定化マウス (RyR2 V3599K-KI))によってERストレスが軽減され、CKDの進展が抑制されるかをin vivoで検証する。並行して、腎臓から糸球体を単離し足細胞を培養する。糸球体と足細胞のレベルでER・Ca2+動態とERストレスマーカーを評価し、腎糸球体足細胞におけるRyR2の役割を検証する。また、マウスCKDモデルの尿検体を用い、足細胞傷害を鋭敏に反映する尿中バイオマーカーを探索する

研究成果情報

2023

2022

2021

成果の概要

(1) リアノジン受容体（RyR2）構造安定化 {①薬理的介入：RyR安定化薬の慢性投与 ②遺伝的介入：RyR2遺伝子改変（RyR2-V3599Kノックイン→カルモジュリン（CaM）がRyR2に高親和性に結合)} による慢性腎臓病（CKD）の進展抑制を検証
①5/6腎臓摘出モデル：野生型（WT）とRyR2安定化マウス（RyR2-V3599Kノックインマウス）に5/6腎臓摘出を行った。WTでは、糸球体濾過量（GFR）は低下し糸球体が硬化したが、RyR安定化薬を慢性投与したWTとRyR2安定化マウス（RyR2-V3599K）の5/6腎臓摘出モデルでは、GFRの低下と糸球体の硬化が抑制された。5/6腎臓摘出モデルでは蛋白尿の表現型が得られず、片腎＋BSA負荷モデルを作成した。
②片腎＋BSA負荷モデル：WTとRyR2安定化マウス（RyR2-V3599K）に片腎摘出とBSA負荷を行った。WTでは、蛋白尿が出現したが、RyR安定化薬を慢性投与したWTとRyR2安定化マウス（RyR2-V3599K）では、糸球体硬化・足細胞傷害・蛋白尿・尿細管傷害が抑制された。片腎＋BSA負荷モデルにおいて、尿中アルブミン/クレアチニン比と尿中フィブリノゲンは正の相関があり、RyR2構造安定化(薬理的/遺伝的介入)が尿中フィブリノゲンを低下させた。
2つのCKDモデルで、薬理的/遺伝的なRyR2構造安定化がCKDの進展を抑制することが示唆された（特許出願中）。
(2) 腎細胞のERストレス応答を検証
培養足細胞において、RyRとCaMの共局在を確認し、RyR2構造安定化(薬理的/遺伝的介入)が、Tunicamycin/BSA誘導性の過剰なERストレス応答を抑制した。
(3) 臨床研究への展開
特定臨床研究「進行したCKD患者を対象としたRyR安定化薬の薬物動態試験（単回投与）」を完了し、予定症例5例の薬物動態を解析し、進行した慢性腎臓病患者を対象としたRyR安定化薬の安全性を評価した。また、「進行したCKD患者におけるRyR安定化薬の腎機能に与える影響を評価する試験」を令和6年2月1日に開始し、令和6年3月27日第1例目の同意を取得した。