研究課題情報
課題管理番号
23ek0109558h0003
統合プロジェクト（二期）

疾患基礎研究プロジェクト<第二期>

事業名

難治性疾患実用化研究事業

タグ（2023）

研究開発目的： 基礎医学研究

研究の性格： 疾患を特定した基礎医学研究<生命・病態解明研究>

研究モダリティ： in vitro

ICD-10大分類： 神経系の疾患

対象疾患領域： 難病 ,  精神・神経疾患 ,  老年医学・認知症

補足確認： 診断 ,  治療

タグ（2022）

研究の性格： 生命・病態解明等を目指す研究

開発フェーズ： 該当なし

承認上の分類： 薬機法分類非該当

対象疾患： その他

疾患領域： 難病 ,  精神・神経疾患

開発目的： 診断 ,  治療

タグ（2021）

研究の性格： 生命・病態解明等を目指す研究

対象疾患： その他

開発目的： 予防・健康 ,  診断 ,  治療

代表研究機関
公立大学法人奈良県立医科大学
研究代表者

(2023) 七浦仁紀, 公立大学法人奈良県立医科大学, 医学部　・助教

(2022) 七浦仁紀, 公立大学法人奈良県立医科大学, 医学部　・助教

(2021) 吉澤拓也, 学校法人立命館, 立命館大学 生命科学部 生物工学科 ・　講師

研究期間
2021年度 - 2023年度
課題への総配分額
19,499 千円
研究概要（2023）
疾患関連変異によって、相分離性タンパク質の状態がどのような異常を引き起こすかをヒドロゲル結合実験により解析を行う。さらに超遠心分析(AUC)などの物理化学的解析によって分子レベルでの解析・評価を行う。超遠心分析(AUC)では、遠心力場における粒子の沈降を解析することで、溶液中における分子の会合状態を評価する。温度や濃度条件を条件検討し、相分離を形成する過程を段階ごとにそれぞれ解析することで、液滴形成過程を解析する。また透過型電子顕微鏡による観察やチオフラビンTアッセイにより、変異型クロスβポリマーの伸長を評価する。
研究概要（2022）
疾患関連変異によって、相分離性タンパク質の状態がどのような異常を引き起こすかをヒドロゲル結合実験により解析を行う。さらにX線/中性子散乱(SAXS/SANS)と超遠心分析(AUC)によって分子レベルでの解析・評価を行う。SAXS/SANSでは精製した変異体タンパク質にX線や中性子の量子ビームを照射し、その散乱を解析することで、溶液中におけるタンパク質の分子構造を評価する。野生型との比較を行うことで、変異体の構造安定性を評価する。超遠心分析(AUC)では、遠心力場における粒子の沈降を解析することで、溶液中における分子の会合状態が評価する。温度や濃度条件を条件検討し、相分離を形成する過程を段階ごとにそれぞれ解析することで、液滴形成過程を解析する。これまでに、測定系を立ち上げた。今年度はさらに条件を詰め、最適な測定系によるデータ収集および解析を行う。これにより変異体の液滴形成能と会合状態の関係性を評価する。
研究概要（2021）
筋委縮性側索硬化症(ALS)の原因とされるタンパク質に着目をし、これまでに見出されている疾患関連アミノ酸変異体の相分離異常解析を行う。相分離では、低複雑性ドメインによる分子間のクロスβポリマー形成が重要であることが示唆されている。クロスβポリマーは液滴形成に重要である一方で、異常に伸長することでアミロイド様線維となり細胞毒性をもたらすことが示唆されている。しかし、遺伝性疾患で見出されている変異が、どのようにクロスβポリマーに影響を及ぼすかについては不明である。当年度は特にFUSの解析を進める。高純度に精製した変異体タンパク質を用いて、相分離による液滴形成能やその異常を評価する。並行して細胞内の局在および相分離解析を行う。これまでに、疾患関連する変異体群は細胞内に凝集体を形成することが明らかになっているが、その形成物の差異については明らかになっていない。相分離という観点により解析を行い、分子レベルと細胞レベルの両面からALSを引き起こすと考えられる変異型タンパク質の動態を明らかとすることを目的とする。
研究成果情報
2023
2022
2021