薬物誘発性腎障害（drug-induced kidney injury, DIKI）のin vitro評価系構築を目指し、昨年度に引き続き三次元培養ヒト近位尿細管上皮細胞（3D-hRPTEC）を用いた薬物曝露試験を行った。腎毒性の評価手法として、細胞内ATP量の20%減少濃度 (EC₂₀値)を算出し、臨床最大血中濃度（C_max）の100倍以内となる場合は陽性とした。EC₂₀値を用いて解析を行った結果、21種のDIKI陽性化合物のうち、7日曝露では14種、28日間曝露では16種の薬物で陽性を示し、陽性化合物を陽性として判断できる感度（sensitivity）はそれぞれ66.7%及び76.2%となった。また細胞内ATP量の低下を示した薬物のEC₂₀値は7日間曝露よりも28日間曝露でより低い値となった。このため、28日間曝露は7日間曝露よりも感度の高い毒性評価が可能であることが示された。一方、DIKI陰性化合物を陰性として検出できた特異度（specificity）は7日間曝露で100%、28日間曝露で90.9%となった。さらに、HK-2細胞を用いて3日間の細胞毒性試験を行ったところ感度は57.1%、特異度は90.9%と示された。以上の検討から、細胞内ATP量 の測定がin vitro DIKI評価において有用なバイオマーカーとなることが示され、また3D-hRPTECは従来系のHK-2細胞よりも高い感度を示す細胞毒性試験系であることが示された。一方、ATP低下を示さない化合物も観察されたことから、今後は画像診断法などを組み合わせることで、さらに高いsensitivityを持つDIKI評価方法を構築していくことが課題として挙げられた。また、昨年度に引き続きfarnesoid X receptor (FXR) 活性化によるOAT1の発現低下メカニズムを追求した。その結果、3D-hRPTECを用いたCUT & RUN法を新規に確立し、OAT1の発現変動に関与する転写因子の絞り込みに成功した。