研究開発代表者：阿部雄一
癌特異的なゲノム変異、あるいは翻訳後修飾を持つタンパク質などから生じた癌抗原は、液性免疫によって認識され、それらの抗原を認識する自己抗体の産生を誘導する。そのため我々新しいNASH肝癌バイオマーカー確立を目指し、NASH肝発癌モデルマウス（高脂肪食MC4R発現阻害マウス）から、高脂肪食20週目（NASH）、35週目（肝発癌）、50週目（肝癌増悪）、対照群として通常食のMC4R発現阻害マウス20週目（NAFLD）、WTマウスの20週目、50週目の血液を用いて自己抗原プロテオミクスを実施した。同定された367個の抗原タンパク質からバイオマーカー候補を選び出し、肝癌患者血漿を用いた初期検証を進めている。また前年度より進めていた血漿プロテオミクスのバイオマーカー候補についても新たに候補を追加し、ELISAアッセイを構築した。令和4年度までに、血漿プロテオミクスについて5タンパク質は構築完了、2タンパク質は条件検討中である。自己抗原プロテオミクスについて、11タンパク質は構築完了、4タンパク質は条件検討中である。名古屋大学消化器内科より提供された診断時血液検体（肝発癌前後のペア症例：16例ずつ、対照32例）を用いて、肝癌診断精度についてAFPと比較した結果、抗原2種の自己抗体が肝癌患者血中で有意に増加していた。これらの自己抗体・AFPのマルチマーカーパネルは、AUC=0.857と、AFP単独のAUC値（0.602）に比べて、非常に良好な診断精度を示している。また肝癌治療標的の探索においては、コレステロールを含む脂肪酸代謝経路の亢進がNASH肝発癌モデルマウスの各種オミクス解析から認められたため、遊離脂肪酸が蓄積したNASH組織特有のLipotoxicity制御メカニズム解明を目指している。肝癌培養細胞に遊離脂肪酸を処理した条件下での候補遺伝子のノックダウン・阻害剤処理による機能検証を進めている。
研究開発分担者：田口歩
NASH由来肝癌マウスモデルから樹立した細胞株から、肝癌分子標的薬Sorafenib耐性株を作成し、リン酸化プロテオミクスの比較による耐性化メカニズム解明を進めている。また、別の肝癌分子標的薬Lenvatinibと合成致死を引き起こす標的探索のため、全ゲノムCRISPRライブラリによる機能的スクリーニングを実施した。Lenvatinib処理下のみで細胞増殖阻害効果を示した複数の遺伝子について、機能検証を進めている。
研究開発分担者：菅波孝祥
　　 　引き続き、NASH由来肝癌マウスモデルの肝癌組織、周囲非癌肝組織、血漿検体を愛知県がんセンターに提供した。