SARS-CoV-2 のウイルス粒子成熟にはEタンパク質とヒト宿主内の多くの足場タンパク質の相互作用が必須である。本課題では、R3年度の当事業課題で発見したヒトSyntenin-1の阻害剤のうちから、特に有望な化合物2種の大量合成を実施し（廣明）、シリアンハムスターを用いた感染動物モデルにおける有効性を検証した。ネブライザーを利用した投与実験において、第二世代抗新型コロナ薬NPL-3028投与群では，対象群に比べて体重増加率が高かった。（鈴木）。
またヒト肺腺上皮細胞を用いて，第1世代化合物（NPL-1010）の50% ウイルス抑制濃度を調べたところ，武漢株に対しては12.7 μM，デルタ株に対しては9.4 μM，そしてオミクロン株に対しては17.0 μMであった。NPL-1010の50% 細胞毒性濃度は，617.0 μMであり，選択指数は65〜24であった。NPL-1010を用いてTime-of-addition assayを実施した結果，NPL-1010はSARS-CoV-2増殖の後期段階を標的としていることが推測された。更に，NPL-1010併用によって，SARS-CoV-2に対する既存薬のin vitro抗ウイルス阻害効果が相乗的に高まった。（鈴木）
溶液NMRを用いた化合物の相互作用解析では、Kdが40 μM程度と結合が弱かったため、精密分子設計の必要性が示唆された。Syntenin-1-PDZ1と阻害剤誘導体との共結晶化を行い、複数の複合体結晶から分解能2.4Å以下で構造決定に成功した。しかし結合している薬剤の電子雲は不明瞭であった。（廣明）
他方、新型コロナウイルスSARS-CoV-2 のウイルス様粒子Virus Like Particle(VLP)を産生させ、放出されたVLPを高感度にて検出する実験系を開発しEタンパク質PDZ結合領域がウイルス粒子形成に必須であることを示す論文を公表した（Miura et al, 2023, J Virol.）。VLP産生・高感度検出系を用いて、第二世代候補化合物NPL-3028が第一世代候補化合物よりも強くVLP産生を阻害することを明らかにした。さらに、E結合PDZ因子に対してカスタムsiRNAライブラリー(52種)を作成しVLP放出阻害を指標にスクリーニングした。その結果、新たに6種類のPDZ因子がウイルス粒子形成に必要であることを示した。(森田)