全体：先行研究で腫瘍浸潤リンパ球（TIL）で腫瘍細胞を特異的に認識して攻撃しているT細胞（腫瘍特異的T細胞）を同定する新規マーカーとして接着因子を見出した。さらにこの接着因子陽性腫瘍特異的T細胞にゲノム異常を同定したが、その機能や臨床的な意義を明らかにし、がん免疫療法の効果予測、長期の効果持続や治療中断のバイオマーカー、TILのゲノム異常を標的にする新しいがん免疫療法の開発に繋げる目的で研究開発を行った。同定した2つのゲノム異常を遺伝子トランスフェクションで回復させたところ、T細胞の活性化が低下し、Jurkat細胞でそれぞれの遺伝子をノックダウンすることで逆に活性化することを明らかにした。そのうち1つの遺伝子をT細胞特異的にノックアウトするコンデョショナルノックアウトマウスと、ミトコンドリア機能を落とすコンデョショナルノックアウトマウスを作成し、抗PD-1抗体を用いた抗腫瘍効果の検討を行ったところ、前者については明らかに抗腫瘍免疫応答、抗PD-1抗体の効果が上がることを確認し、後者に関しては逆に効果が低下し、特に腫瘍の再接種がほとんど拒絶されなかった。また、腫瘍特異的T細胞のマーカーとして先行研究で明らかにしていた接着因子の機能解析も行った。強制発現することでT細胞機能が抑制され、コンディショナルノックアウトマウスでは抗腫瘍免疫応答が活性化した。その機序としてはTCR/CD3のT細胞表面での発現を低下させ、TCRシグナルが入りにくくなってT細胞機能が低下していることを明らかにした。さらに150例程度で同定していた接着因子を染色し、CD8陽性T細胞が多く浸潤している症例で効果予測バイオマーカーになることを明らかにした。また、前年度確立した方法でシングルセルシークエンスを追加で行い前年度のデータとマージして新たなゲノム異常を同定し、収集した検体200例程度で解析中である。
代表者（冨樫庸介）：先行研究でTILで腫瘍細胞を特異的に認識して攻撃しているT細胞（腫瘍特異的T細胞）を同定する新規マーカーとして接着因子を見出した。さらにこの接着因子陽性腫瘍特異的T細胞にゲノム異常を同定したが、その機能や臨床的な意義を明らかにし、がん免疫療法の効果予測、長期の効果持続や治療中断のバイオマーカー、TILのゲノム異常を標的にする新しいがん免疫療法の開発に繋げる目的で研究開発を行った。同定した2つのTILのゲノム異常を遺伝子トランスフェクションで回復させフローサイトメトリーやELISAで解析したところ、T細胞の活性化が低下し、Jurkat細胞でそれぞれの遺伝子をノックダウンすることで逆に活性化することを明らかにした。そのうち1つの遺伝子をT細胞特異的にノックアウトするコンデョショナルノックアウトマウスとミトコンドリア機能を落とすコンデョショナルノックアウトマウスを作成し、抗PD-1抗体を用いた抗腫瘍効果の検討を行ったところ、前者については明らかに抗腫瘍免疫応答、抗PD-1抗体の効果が上がることを確認し、後者に関しては逆に効果が低下し、特に腫瘍の再接種がほとんど拒絶されなかった。また、腫瘍特異的T細胞のマーカーとして先行研究で明らかにしていた接着因子の機能解析も行った。強制発現することでT細胞機能が抑制され、コンディショナルノックアウトマウスでは抗腫瘍免疫応答が活性化した。その機序としてはTCR/CD3のT細胞表面での発現を低下させ、TCRシグナルが入りにくくなってT細胞機能が低下していることを明らかにした。さらに150例程度で同定していた接着因子を染色し、CD8陽性T細胞が多く浸潤している症例で効果予測バイオマーカーになることを明らかにした。また、シングルセルシークエンスから新たなゲノム異常を同定し、収集した検体200例程度で解析中である。
分担者（山下和男）：先行研究でTILで腫瘍細胞を特異的に認識して攻撃しているT細胞（腫瘍特異的T細胞）を同定する新規マーカーとして接着因子を見出した。さらにこの接着因子陽性腫瘍特異的T細胞にゲノム異常を同定したが、その機能や臨床的な意義を明らかにし、がん免疫療法の効果予測、長期の効果持続や治療中断のバイオマーカー、TILのゲノム異常を標的にする新しいがん免疫療法の開発に繋げる目的で研究開発を行った。前年度確立した方法でシングルセルシークエンスを3例追加で行い前年度のデータとマージして新たなゲノム異常を同定した。