本研究では、新たな作用機序のマラリア治療薬のヒット化合物を同定するために、原虫の生存に必須であるオートファジー関連タンパク質（ATG）を標的とした機能阻害剤の同定を効率的に実施できるスクリーニング法の開発を目指した。マラリア原虫ATG8の脂質化（成熟化）反応をin vitroで再構成し、これを基盤とした化合物スクリーニングを計画した。組換えタンパク質合成にはコムギ無細胞系を、化合物スクリーニングにはAlphaScreen法を用いた。ATG8脂質化実験に必要な５つのATGタンパク質（ATG3, ATG5, ATG7, ATG8, ATG12）を合成し、これらのATGタンパク質とリポソームを混合するATG8脂質化試験を実施した。しかし、効率的な脂質化シグナルを得ることはできなかった。そのため、ATG8とATG3の2分子間の相互作用に限定し、これをAlphaScreen法で解析する手法に切り替えた。また、実際の化合物ライブラリーを利用したスクリーニングから、約200万種の仮想化合物ライブラリーを使用したin silicoスクリーニングに切り替えた。マラリア原虫ATG8は、その立体構造とATG3との相互作用部位が解明されているため、この相互作用の阻害を狙った化合物のin silicoスクリーニングを実施した。結合トップ100化合物をヒトATG8（LC3B）との結果と比較すると、95種がマラリア原虫特異的であり、原虫ATG8に対して特異的な阻害剤が設計可能であることが示された。同定された化合物から結合親和性、解離定数、合成難易度を考慮した約30化合物を入手し、これらによるマラリア原虫ATG8-ATG3相互作用阻害と増殖阻害について検証準備ができた。本研究の実施によって、機能部位が解けている分子であれば、in silico化合物スクリーニングとAlphaScreenによって、短時間で阻害剤候補が同定されうることが示され、これらを基盤技術とした大規模スクリーニングのスキームが構築できた。本成果を受け、ヒット化合物同定までをさらに迅速かつ低コストに実施する戦略と人的ネットワークを構築中である。