本開発では、がん研究会の研究成果を基にしてAYA世代の希少がんである骨肉腫を対象とした抗体医薬開発を、サルコーマセンターを擁すがん専門病院を持つ公益財団法人がん研究会とアピ株式会社の共同体で実施している。アピ株式会社ではヒト化中和抗体AP201原薬の製造およびコンパニオン診断薬開発を、がん研究会では病態モデルを使用したヒト化中和抗体の効果・安全性の検証、診断システムの確立を担当しており、本年度は本プログラムの最終年度であり、ほぼ、全ての研究開発を完了することができた。以下、本年度の概要を記す。
　がん研究会シーズ（マウス抗ポドプラニン抗体PG4D2）と同等の結合阻害活性を有するヒト化抗ポドプラニン中和抗体について、「抗ポドプラニン抗体」特許6737482　(2020.7.20)として特許登録が完了した。この知財化されたシーズを元に本年度では、ヒト化中和抗体AP201製造用発現CHO細胞株の抗体遺伝子コピー数及び継代安定性を確認した後、research cell bank (RBC)として保管し、ヒト化中和抗体A201の製造のための培養・精製工程を確立した。この確立した工程を用い、30Lのリアクター培養より4.3gのヒト化中和抗体AP201を製造した。この抗体は、純度は98%以上、確認試験で抗体分子を認め、結合阻害活性はPG4D2と同等、不純物プロファイルは宿主由来タンパク質22.8ppm（暫定規格100 ppm未満）、宿主由来DNA 0.9 pg/mg protein（暫定規格10 ng/dose）、エンドトキシンは定量限界以下であり、高品質の抗体であることが確認された。さらに、このヒト化中和抗体AP201原薬の製剤処方の検討予備安定性試験を実施し、通常保管3箇月間安定であることを確認した。
　コンパニオン診断薬の開発において、固相化抗体、検出抗体の組み合わせ及び血液検体の前処理方法など、8回の改訂を行い、最終的に血液中のポドプラニンを測定するための世界最高感度のELISA系を組み上げることができた。このELISA系を用い、がん患者由来の血液検体におけるポドプラニンを定量的に検出することが可能となった。同時に、この改訂の過程において、捕捉抗体を固相化するための独自技術を開発することができ、感度の向上及びバックグラウンドの低減が実現できた。このELISA系をがん研究会及び臨床検査会社に技術移管し、真度、精度、日差・測定場所変動などのバリデーションを実施し、血液検体中のポドプラニンを定量可能と評価された。さらに、がん研究会では、がん研有明病院に設置されているサルコーマセンターや整形外科と連携し、検体提供の同意が得られた骨軟部腫瘍患者からの血液検体を集め、血中ポドプラニン濃度の測定を実施した。その結果、血中ポドプラニン濃度と悪性度が正の相関を示すとの結果を得た。また、骨肉腫以外にも脂肪肉腫や未分化多形肉腫などにおいて高い血中ポドプラニン値を示すことも判明した。
　ポドプラニンは種差があり、抗体分子自体の安全性の評価は可能であるがサルを用いた生物学的な安全性の評価を行うのは困難である。非臨床安全性試験の予備検討として、ヒト化中和抗体AP201のサル配列に対する結合性を調べ、ヒト配列に対する結合性の約3.68%（EC50のヒト配列/EC50サル配列比率）であり、非特異的な結合は見られないことが明らかとなった。また、種差の問題を解決するために樹立されたヒトポドプラニンノックインマウスの血液中において、ヒト化中和抗体AP201は、生体内で一般の抗体医薬品と同等レベルの安定性を持つこと、さらに血液学的、組織的にも極めて高い安全性を持つことが確認された。
　現在、グローバル企業も含めた製薬企業やベンチャーキャピタル、銀行などに本研究開発成果を紹介し、骨軟部腫瘍抗体医薬品の製造販売のためのパートナー候補企業との交渉を詰めている。