新規CL合成経路の解明
ミトコンドリアのPE量が減少した際に活性化されるUps 1非依存的なCL合成経路に関与する遺伝子を探索するために，これまで出芽酵母を用いた赤白スクリーニングや，トランスポゾン遺伝子を用いたSATAY法（Saturated Transposon Analysis in Yeast）を行ったが，遺伝子の同定には至らなかった。そこで次の手段として，特殊なCL合成経路を阻害する化合物を単離することで因子を解析することとした。東京大学創薬機構のFull libraryから，候補化合物を複数単離することに成功した。
ヒト小胞体・ミトコンドリア間リン脂質輸送のin vitroアッセイ手法の確立
ヒト培養細胞から単離した膜画分を用い，試験管内で小胞体-ミトコンドリア間におけるリン脂質合成，輸送を評価できる実験系の確立をした。特に肝細胞由来のPLC-PRF-5やHep-G2細胞で高いホスファチジルエタノールアミン（PE）合成活性（ホスファチジルセリン(PS)脱炭酸活性）があることがわかった。様々な条件を最適化することで，小胞体膜で合成されたPSがミトコンドリアへと輸送されPEに，さらにPEがミトコンドリアから小胞体へと輸送され，ホスファチジルコリン(PC)に変換される一連の反応をモニターできる実験系を確立した。
また出芽酵母における小胞体・ミトコンドリア間リン脂質輸送のin vitroアッセイ手法を応用し，小胞体以外のオルガネラからミトコンドリアへの脂質輸送を計測できる実験系を確立した。具体的には，大腸菌のホスファチジルセリン合成酵素（PssA）を，PS合成酵素を欠失させた出芽酵母の様々なオルガネラ膜上に，異なる膜トポロジーで発現させた酵母株を作製し，膜画分を単離した。この膜画分を用いて合成したPSの運命（ミトコンドリアにおけるPSの脱炭酸）を追跡することで，脂肪滴やペルオキシソーム，ミトコンドリア内膜のマトリクス側からミトコンドリア膜間部へのリン脂質の流れを解析する事が可能となった（Shiino et al., FEBS J. 2020）。
リン脂質合成輸送阻害剤の単離と機能評価
PEとPCの合成が，小胞体・ミトコンドリア間のリン脂質輸送に依存する様に改変した特殊な酵母細胞の増殖を特異的に阻害する化合物を，22万種類以上の化合物から単離した。これらの化合物をin vitroリン脂質輸送実験系を利用した二次スクリーニングにより絞り込み， ER膜におけるPCの合成を阻害する化合物を複数単離することに成功した。昨年度までにIC50が7 μMのPC合成阻害剤を得ていたが，新たにIC50が2 μMの化合物を単離した。