腫瘍抗原を特異的に認識するT細胞を体外で準備・増幅して患者に輸注する養子免疫療法において、抗腫瘍T細胞が分化・疲弊に伴い長期生存能・持続的なエフェクター効果が阻害されるという問題がある。本研究ではエピゲノム改変を通じてこの問題を解決することを目標とし、昨年度までにエピジェネティック遺伝子Aのノックアウトにより、未分化メモリーマーカーの維持、サイトカイン分泌能の亢進を確認できたことから、今年度は同遺伝子改変T細胞の機能解析をさらに進めた。
　遺伝子AをノックアウトしたCAR-T細胞は、液性腫瘍、固形腫瘍いずれのモデルにおいても優れた長期生存能と、持続的な抗腫瘍効果を示した。これらは複数の標的抗原に対するCAR-T細胞 (CD19, GD2, Mesothelin)で確認された。またTCR導入T細胞 (A2/MART12)、腫瘍浸潤T細胞においても遺伝子Aの効果が再現され、標的抗原、治療モダリティを問わず適用できることがわかった。また同遺伝子をノックアウトしたCAR-T細胞のエピジェネティック変化、遺伝子発現変化をATACシークエンス、RNAシークエンスを用いて網羅的に解析すると、9500以上のゲノム領域におけるクロマチン開閉状態の有意な変化、3000以上の有意な遺伝子発現変化が確認された。有意な変化が起こった遺伝子群に着目すると、エピゲノム変化、遺伝子発現変化が強い相関を示しており、遺伝子Aのノックアウトにより広範なエピゲノム変化、これに伴う遺伝子発現変化が生じることを確認できた。以上の結果より、遺伝子Aのノックアウトにより長期生存能・持続的抗腫瘍効果に優れた抗腫瘍T細胞が作製できることを示した。