SPOPは、cullin3(CUL3)型ユビキチンE3リーガーゼ複合体の基質受容体として機能する分子で、前立腺がん患者の約15％に遺伝子変異が見出され、基質認識能を消失している。我々は、代表的な変異型SPOP^F133Vの基質認識機能を回復させる低分子化合物の取得を目指して、スクリーニングを施行した。その結果、SPOP^F133V-基質ペプチドとの結合活性を回復させる化合物として#533を取得した。#533は野生型SPOP(SPOP^WT)及びSPOP^F133Vに対して、それぞれ2.7 x 10^-7及び4.6 x 10^-7モル濃度の親和力でもって直接結合することが明らかとなった。#533は10 nM～10μMの範囲で投与量依存的に結合を促進した。#533を用いて in vitro及びin vivoバリデーションへと進めた。次に、#533のin vitroバリデーションとして① 基質変動の定量解析と② SPOPの機能評価を進めた。① 基質変動の定量解析：SPOPの既知基質分子22種及び新規基質候補分子112種のイオン化ペプチド（proteotypic peptide：PTP）を決定し、このPTPをタンデムに連結した人工タンパク質を合成、安定同位体標識し、定量用標準タンパク質として用いることでSPOP基質変動定量解析SRMシステムを構築した。② SPOPの新規機能としてDNA複製ストレス消去能を明らかにし、これを基に、#533を評価した結果、SPOP^F133V発現により誘導されるDNA複製ストレスが#533投与量依存的に見事に打ち消され、正常レベルに戻ることを確認した。このことから、#533はSPOP^F133Vの機能を回復させ、DNA損傷を顕著に減ずることを実証でき、目的とする活性を有するリード化合物の取得に成功した。現在、SPOP^WT・F133V-#533共結晶構造解析を進めており、in silicoによる化合物の最適化を図っている。また、#533のin vivoバリデーションに向けて、マウスモデルの作成に着手した。