アルツハイマー病（AD）の予防・根本的治療法の確立のためにAβの主要分解酵素ネプリライシンの活性制御機構および代謝機構明らかにし、その制御因子を基にした、AD予防・治療法のための創薬標的を提示する必要がある。ネプリライシンの活性制御および代謝制御機構を網羅的に明らかにするために、下記研究を遂行した。① 神経回路におけるネプリライシン活性増強因子の同定とネプリライシン代謝機構の解析大脳皮質・海馬由来神経細胞と大脳基底核由来神経細胞との共培養系を用いて解析した。(i)各種代謝阻害剤等を共培養系へ添加した時のネプリライシンン発現を生化学的に解析した結果、ネプリライシンンの代謝にはリソソーム系が関与していることを明らかにした。(ii)ソマトスタチン受容体(SSTR)1およびSSTR4の下流でネプリライシンンの活性制御に関与する因子として同定した因子（Factor A）に関するin vivo解析へ移行した（下記③へ）。② ネプリライシン活性に対する性差の影響性差によるネプリライシンン活性制御機構の解析を行った。メス由来初代培養神経細胞の培養上清中に、ネプリライシンンの細胞表面局在を低下させる因子が存在することを明らかにした。これは、ある特定の受容体－キナーゼ経路を介した細胞内シグナル経路による可能性を示した。③ ADモデルマウスをベースとした病態解析①-(ii)で同定したFactor Aについて、ゲノム編集により Factor A 欠損マウスの作製に成功した。一方、Factor Aの標的分子として標的Aが知られており、標的Aの制御因子として臨床でも使用されている薬剤AをApp knock-inマウスへ３ヶ月間経口投与した結果、認知機能障害の改善およびアミロイド病理の改善を示した。これら結果から、薬剤Aがドラッグリポジショニングによりアルツハイマー病の予防に寄与する可能性が示された。④ ADモデルマウスをベースとした病態解析のためのマウスの飼育維持各実験に間断なく供給できるように、計画的なマウスの飼育維持を進め、本プロジェクトのためのリソース基盤とするため、２００ケージ規模のリソース形成を達成した。