1. ヒト脳梗塞由来iNSPCs/iSCs (hc- iNSPCs/iSCs)の解析平成30年度では、iNSPCs/iSCsはSingle cellからも電気的活動を持つ細胞に分化することを証明した。Microarrayでは主成分解析において、hc-iNSPCs/iSCsは胎児脳由来のペリサイト株に最も近い性格を示しており、大脳由来hc-iNSPCs/iSCsと小脳由来hc-iNSPCs/iSCsも非常に近い性格であった。またhc-iNSPCs/iSCs はES細胞由来の神経幹細胞より間葉系幹細胞に近い性格を示していた。hc-iNSPCs/iSCsは、アストロサイト株とは大きく異なることも明らかとなった。2. マウスモデルを用いたiNSPCs/iSCsによる神経再生メカニズムの検討平成30年度では、SCIDを用いた脳梗塞モデルマウスを作成し、脳梗塞誘導3週間後にGFPにてラベルしたhc-iNSPCs/iSCsを脳梗塞巣直下の正常組織に移植したところ、1週間後には良好な生着を認め、Tuj-1を発現していた。2週間後においては、脳梗塞組織内および境界領域に少数のGFPおよびTuj-1の両者が陽性の細胞を認めた。しかし4週間以降では、GFP陽性細胞は現時点ではほとんど確認できず、SCIDマウスであっても4週間以降には免疫系により排除されている可能性が高い。この点は現在も慎重に検討中である。これらの結果は、iNSPCs/iSCsの慢性期投与により神経機能の改善が可能であるが、そのメカニズムとしては神経新生よりも、他のメカニズムが関与している可能性が高く、今後は別の角度からの検討も必要である。3. 骨髄からのiNSPCs/iSCs (biNSPCs/iSCs)分離の試みiNSPCs/iSCsの起源が脳ペリサイトであることを鑑みると、ペリサイト前駆細胞を分離できれば脳組織以外からもiNSPCs/iSCsを獲得することができるはずである。我々は、その候補として、骨髄細胞内に血管周皮細胞(ペリサイト)に分化しうる分画があることを見い出し、その特性を検討した。脳梗塞モデルマウスの骨髄組織をiNSPCs/iSCsと同様の方法にて分離培養し、biNSPCs/iSCsを得た。biNSPCs/iSCsはペリサイト前駆細胞としての性格を有し、ペリサイトや血管内皮への分化能を有していた。これらの結果は、biNSPCs/iSCsは、脳梗塞由来iNSPCs/iSCs(hc-iNSPCs/iSCs)と同様に、幹細胞マーカーならびにペリサイトマーカーを発現し、ペリサイトや神経に分化し得る細胞であると考えられる。またbiNSPCs/iSCsの神経症状改善効果をマウス脳梗塞モデルで検討したところ、biNSPCs/iSCsの投与により、脳梗塞後に見られる神経学的後遺症が改善されることが明らかとなっているが、biNSPCs/iSCsとhc-iNSPCs/iSCsの差については、もう少し検討が必要と考えられる。本結果は、biNSPCs/iSCsを脳梗塞患者から抽出し誘導することで、臨床応用の際の適応患者の幅を広げられる可能性があることを示唆している。こちらもその神経機能改善メカニズムについて、さらに慎重に解明することが必要である。