先端医療振興財団は、京都府立医科大学と共同で、羊膜を基質として用いる口腔粘膜上皮シートの開発を進めてきた。本品治験準備のために、京都府立医科大学の協力を得て基礎検討（ボランティアから採取した口腔粘膜上皮組織試料を用いた口腔粘膜上皮シートの製造及び品質管理バリデーション）を行い、その過程において研究開発項目を実施した。　原料羊膜に関しては、計画中の医師主導治験時に使用する治験用羊膜の入手経路を決定し、基本的な了解を得た。しかし今年度の成果はそれに留まり、製造販売承認後の商業用羊膜入手方法は今後の課題である。上皮シート培養用培地を最終確定するため、生物由来原料のウイルス不活化工程及び成分未開示原料の情報に関して、製造販売元と秘密保持契約を締結した。そして、先端財団と培地製造販売元担当者により、PMDA事前面談を実施した。その結果、培地の生物由来原料基準適合を確認することができたため、上皮シートの培地を最終確定することができた。原料変更に伴う上皮シート同等性評価方法に関しては、上皮シートをホールマウントで細胞核染色して蛍光顕微鏡観察することで、シート全体の定量的かつ客観的評価が簡便にできることを見出した。上皮シートの安定性評価に関しては、上皮シート保管後にコロニー形成試験方法を用いることで、上皮シートの細胞増殖活性評価が可能であることを確認し、また保管時の最適温度帯についても有用な情報を得ることができた。治験時への対応を考慮して、受入試験としての口腔粘膜上皮由来株細胞を用いた培地性能試験を確立した。また、ガス検出法に基づく迅速無菌検査方法を導入するため、工程内各種検体を用いたバリデーションを実施した。さらに、培養終了後の上皮シート及び洗浄液における工程内各種因子の残留濃度を測定した。その結果、最終製品洗浄液の残留濃度測定が、最終製品の安全性評価とともに、洗浄バリデーションとしても有用であることを確認した。治験に対応可能な培養自家口腔粘膜上皮シートの製造・品質管理工程の構築を進めることを目的として、品質試験スキームの見直しを進めた。その結果、治験時の新規安全性試験スキームを策定し、コールドランにおいて実施・検証した。その結果、治験時の製造・品質管理工程のスキームを決定することができた。