AMED研究開発課題データベース 日本医療研究開発機構（AMED）の助成により行われた研究開発の課題や研究者を収録したデータベースです。

• 2021
• 2020

【成果報告書】

成果の概要

臨床研究下にて経口免疫療法（OIT）を行った牛乳アレルギー患者（小児）の末梢血B細胞シングルセル解析から、５０個以上の異なる配列および同一クローナルツリー内の親和性成熟過程の各種抗体を取得した。それら組換え抗体の牛乳アレルゲンコンポーネントへの反応性を評価し、１０個以上の認識抗体を選別した。、主要コンポーネントであるαカゼイン認識抗体については、抗体特性（k-on/k-off等の結合プロファイル）を分子間相互作用解析（SPR解析装置；BLitz）を用いて明らかにした。続いて、非OIT牛乳アレルギー患者由来のIgEのアレルゲン反応性に対する、当該組換え抗体の阻害能などを指標に機能分類した。
これまでに、IgE反応阻害、アレルゲン依存的顆粒球活性化の抑制能を有する抗体を複数抗体取得した。これらヒトIgG4型組換え抗体は、牛乳アレルゲン特異性を有しかつアレルギー反応制御能を有し、誤食やOIT時の過剰アレルギー反応を改善し、アナフィラキシーリスクの抑制や寛容誘導を達成する医療用途が想定される。

バイオマーカー探索では、IgG4クラスの牛乳アレルゲン認識抗体の有用性については一定のコンセンサスがあるが、IgG4以外のIgクラスの有用性および抗体認識エピトープのプロファイリングの有用性を検討した。Igクラスの探索では、特定Igクラスのアレルゲン特異的抗体価がOIT有効性または牛乳アレルゲン負荷に伴い上昇する結果から、アレルゲン特異的IgG4抗体価に比較して、よりOIT効果をよく反映できる可能性を見いだした。この検証のために、当初計画の自施設食物アレルギー児の血清に加えて、外部施施設の牛乳アレルギー患者血清について解析し、特定Igクラスの抗体価がIgG4抗体価と同等以上に有用であるとの結果を得た。
いま一つの抗体認識エピトープのプロファイリングでは、牛乳アレルゲンコンポーネント（α/β/κカゼイン、ラクトグロブリン）のペプチドアレイを作製し、アレルギー患者抗体の反応エピトープを網羅的に解析し、IgEとIgGエピトープを抽出した。簡易な評価系にするため、同定した"共通エピトープ"を検出する「ペプチドELISA」系を構築した。これを用いて、非OITアレルギー患者血清のIgEエピトープの特徴、およびOIT施行アレルギー患者血清のIgG4等エピトープ特徴を解析した。OIT有効 vs. OIT不応答の違い、難治化マーカーに活用できる可能性を見出した。