AMED研究開発課題データベース 日本医療研究開発機構（AMED）の助成により行われた研究開発の課題や研究者を収録したデータベースです。

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• 2020
• 2019

【成果報告書】

成果の概要

本研究開発では腹膜転移性の胃・膵臓がんにおいて高頻度で異常を来すARHGAP-RhoAシグナルに関し、その全貌解明および当該シグナルを標的とした分子標的薬・コンパニオン診断薬の開発を目標とする。具体的には研究代表者独自の内在株を用いた作用機序解明に加え、研究分担者が開発したペプチド模倣アルカロイド化合物を出発点とした創薬研究、ならびに臨床検体を用いた高感度診断法の開発を実施する。
1. ARHGAP-RhoAシグナルの全貌解明
ARHGAP-RhoAシグナルの全貌および細胞死へと至る作用機序解明に関する研究開発項目は、前年度までの機能解析およびオミックス解析により既に完了している。本年度は、前年度に開発した腹膜播種・腹水貯留マウスモデルを用い、RhoAシグナル異常が腹膜転移に与える影響を評価した。RHOA変異を内在する胃がん細胞を用いたin vivo実験により、RhoAシグナルの抑制は腹膜播種を促進すると同時に、上記シグナルの再活性化により転移が制御可能であることを明らかにした（達成度100%）。

2. 転移性胃がんを標的としたリード化合物の創製
2130種類のアルカロイド化合物のスクリーニングから見出した候補化合物7種類の活性を評価した。高活性である1化合物について、初回構造最適化において10化合物、さらに二回目の構造最適化で13化合物の構造類似体を合成・評価した結果、活性が更に向上した1化合物を見出した。上記化合物はARHGAP-RhoAシグナルに異常を来した胃がん細胞に対して、RhoAの下流シグナルを活性化したが、正常細胞への細胞傷害活性の点において改良の余地が残る。さらに、当該化合物のビオチン誘導体を用いたプルダウンアッセイでも標的分子を同定できていないことから、より親和性・選択性の高い化合物への改良が求められる（達成率度50%）。

3. ARHGAP-RhoAシグナル異常の検出
ARHGAP-RhoAのシグナル異常を高感度かつ簡便に検出するため、TaqManシステムを用いたqPCR法の開発を実施した。本年度は前年度に設計した5種類のARHGAP融合遺伝子を検出可能なTaqManプローブを用い、既にシークエンス済みの患者腹水（21症例）を対象として融合遺伝子の検出を試みた。その結果、高感度かつ高精度で標的の融合遺伝子が検出できることを確認した（達成度100%）。

学会誌・雑誌等における論文一覧

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1.Tanaka Y, Chiwaki F, Kojima S, Kawazu M, Komatsu M, Ueno T, Inoue S, Sekine S, Matsusaki K, Matsushita H, Boku N, Kanai Y, Yatabe Y, Sasaki H, Mano H. Multi-omic profiling of peritoneal metastasis in gastric cancer identifies molecular subtypes and therapeutic vulnerabilities. Nature Cancer, 2021, 2, 962-977, doi: 10.1038/s43018-021-00240-6

2.Komatsu M, Nakamura K, Takeda T, Chiwaki F, Banno K, Aoki D, and Sasaki H. Aurora kinase blockade drives de novo addiction of squamous cell carcinoma to druggable EGFR signalling. Oncogene.2022, 41, 2326-2339, doi: 10.1038/s41388-022-02256-3

3.Kobayashi Y, Takeda T, Kunitomi H, Chiwaki F, Komatsu M, Nagai S, Nogami Y, Tsuji K, Masuda K, Ogiwara H, Sasaki H, Banno K, Aoki D. Response Predictive Markers and Synergistic Agents for Drug Repositioning of Statins in Ovarian Cancer. Pharmaceuticals, 2022, 15. doi: 10.3390/ph15020124

4.Yanagihara K, Iino Y, Yokozaki H, Kubo T, Oda T, Kubo T, Komatsu M, Sasaki H, Ichikawa H, Kuwata T, Seyama T, Ochiai. A Pathobiology, 2022, 1-11, doi: 10.1159/000521714

学会・シンポジウム等における口頭・ポスター

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1.転移性胃がんにおける腫瘍抑制シグナルARHGAP-RhoAの失活は細胞接着が惹起するアポトーシスの回避に必須である、小松将之、市川仁、千脇史子、坂本裕美、小松崎理恵、吉田輝彦、竹下文隆、佐々木博己、第80回日本癌学会学術総会、2021/10/2、国内、ポスター

国内　/　ポスター

2.170人の患者の腹水からの239株の腹膜転移性癌細胞株の樹立とその特徴、千脇史子、小松将之、坂本裕美、高橋真美、小松崎理恵、松下弘道、朴成和、平岡伸介、竹下文隆、市川仁、吉田輝彦、松崎圭佑、佐々木博己、第80回日本癌学会学術総会、2021/10/2、国内、ポスター

国内　/　ポスター